- ￥2200
- 赫澎生物
- 上海
- HPBIO-JM3159
- 2025年11月16日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
干燥密封保存
- 库存：
现货
- 供应商：
赫澎（上海）生物
- 规格：
20次
产品内容
HEPENGBIO稳定液（Reagent A） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品保存的容器
恒温摇床：用于反应孵育
实验步骤
- 准备好可溶性纯化变性蛋白样品
- 移取50微升蛋白样品（10毫克/毫升）到1.5毫升离心管
- 加入xx微升HEPENGBIO稳定液（Reagent A）
- 放进20℃恒温摇床孵育2小时，速度为200RPM
- （选择步骤）移取10微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
- 即刻放进－70℃冰箱里保存
注意事项
- 本产品为20次操作
- 操作时须戴手套
- 本产品的复性效率达80％以上
- 建议与本公司系列包涵体蛋白溶解试剂盒配套使用
- 由于样品的特异性，用户可以优化温度、孵育时间、蛋白浓度，以获得大复性效率
- 如果复性效率过低，建议使用HEPENGBIO可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂盒
- 如果获得满意的复性效果，用户可以按比例扩大复性容量
- 本公司提供系列包涵体蛋白处理试剂产品
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- 作者
- 内容
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文献和实验浓缩后，可用：机械破碎、超声破碎：单纯超声破碎，在小规模下且菌量较少的情况下效果较好，由于能量传递和局部产热等原因，很难用于大体积细胞悬液的破碎，这样部分未破碎细胞与包涵体混在一起，给后期纯化带来困难。因此，在较大规模纯化时先用溶菌酶破碎细菌的细胞膜，再结合超声破碎方法，可显著提高包涵体的纯度和回收率。以及化学方法破碎使细菌裂解,然后以5000-20000g 15min离心，可使大多数包涵体沉淀，与可溶性蛋白分离。 1.3.2洗涤：为了除去包涵体上粘附的杂质，如膜蛋白或核酸，应用洗涤液洗涤包涵体
液，经离心浓缩后，可用：机械破碎、超声破碎：单纯超声破碎，在小规模下且菌量较少的情况下效果较好，由于能量传递和局部产热等原因，很难用于大体积细胞悬液的破碎，这样部分未破碎细胞与包涵体混在一起，给后期纯化带来困难。因此，在较大规模纯化时先用溶菌酶破碎细菌的细胞膜，再结合超声破碎方法，可显著提高包涵体的纯度和回收率。以及化学方法破碎使细菌裂解 , 然后以 5000-20000g 15min 离心，可使大多数包涵体沉淀，与可溶性蛋白分离。 1.3.2 洗涤：为了除去包涵体上粘附的杂质
，与可溶性蛋白分离。 1.3.2洗涤：为了除去包涵体上粘附的杂质，如膜蛋白或核酸，应用洗涤液洗涤包涵体，通常用低浓度的变性剂,过高浓度的尿素或盐酸胍会使包涵体溶解，如2M尿素在50mM Tris pH7.0-8.5左右,1mM EDTA中洗涤。此外可以用温和去垢剂TritonX-100洗涤去除膜碎片和膜蛋白。[3] 1.3.3溶解：一般用强的变性剂如尿素（6-8M）、盐酸胍（GdnHCl 6M），通过离子间的相互作用，打断包涵体蛋白质分子内和分子间的各种化学键，使多肽伸展
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