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- 2026年01月06日
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外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的蛋白，称稳定细胞系。高质量的稳定细胞系在生物学研究中扮演着非常重要的角色，包括基因功能研究、重组抗体、药物开发等。然而构建一个有效的细胞系是一件复杂而费时的工作。安必奇作为专业的生物医药研发服务机构，拥有系列稳定细胞系构建专利技术及丰富的哺乳动物细胞培养经验，可以为您提供各种细胞系定制服务。我们已经为世界各地的客户构建了各种各样的定制细胞系，包括基因过表达（Reporter细胞系、GPCR细胞系、离子通道细胞系等）、Knockdown、Knockout细胞系等。我们深知科研工作的时间宝贵，因此致力于提高效率，提供优质高效的细胞系定制服务。我们构建的细胞系可直接应用于各种下游的生物学研究，包括基因调控、蛋白质工程、重组抗体制备、药物研发等。
技术流程
- 载体构建- 目的基因过表达载体的构建。
- 病毒包装- 表达载体、辅助质粒共转染293FT细胞，收集病毒上清，纯化和浓缩病毒颗粒。若选择转染，则跳过此步。
- 转染、转导- 电转染或转染试剂（脂质体等）进行细胞转染，或病毒转导。
- 筛选- 根据表达载体的筛选基因选择药物进行筛选，如嘌呤霉素、G418等。
- 扩大培养- 将筛选出的单克隆细胞进行扩大培养。
- 鉴定- PCR、Q-PCR、western等从DNA、mRNA、蛋白水平进行检测。
| 服务步骤 | 服务周期 | 交付结果 |
| 目的基因合成 | 1周 | 测序报告 |
| 目的基因亚克隆 | 3天 | 冻干粉质粒、含重组质粒的甘油菌一管、测序报告 |
| 病毒包装 | 1周 | 病毒储存液(>10^8 PFU)、重组后的病毒载体质粒 |
| 阳性克隆筛选 | 2周 | 用于筛选的药物浓度 |
| 阳性克隆鉴定 | 3天 | 阳性细胞株、测序报告、Q-PCR、western检测结果 |
- 多样的细胞种类- 在H1299、2F-2B、4T1、786-O、9607、THP-1、MCF7/ADR、A549、 V79、CHO、HepG2 等多个种属细胞中成功构建过表达、Knockdown和Knockout细胞系。
- 各种表达载体- 通过2A、IRES、多启动子、融合表达等手段，在一个质粒里实现同时表达两个或者两个以上基因。同时，还可以选择多种启动子、报告基因和亲和标签。
- 一站式服务- 我们提供从稳定细胞系构建至重组蛋白生产的一站式服务，满足客户不同的需求。
- 省时省钱- 在先进的实验设备和完善的技术支持下，让您在最短的时间内，用最少的钱获得优质的服务。
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