
纳米抗体技术服务
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- 江西南昌
- 2025年07月14日
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技术服务
在羊驼外周血液中存在一种天然缺失轻链的抗体,该抗体只包含一个重链可变区(VHH)和两个常规的CH2与CH3区,但却不像人工改造的单链抗体片段(scFv)那样容易相互沾粘,甚至聚集成块。更重要的是单独克隆并表达出来的VHH结构具有与原重链抗体相当的结构稳定性以及与抗原的结合活性,是目前已知的可结合目标抗原的最小单位。VHH晶体为2.5nm,长4nm,分子量只有15KDa,此也被称作纳米抗体(Nanobody,Nb)。
VHH可溶性极高,不易聚集,能耐高温、强酸、强碱等致变性条件,适合于原核表达和各种真核表达系统,广泛用于开发治疗性抗体药物、诊断试剂、亲和纯化基质和科学研究等领域。
传统抗体 重链抗体 VHH
纳米抗体诸多方面均优于传统抗体。基于羊驼重链抗体的VHH单域抗体的特殊结构,兼具了传统抗体与小分子药物的优势,几乎完美克服了传统抗体的开发周期长,稳定性较低,保存条件苛刻等缺陷,逐渐成为新一代治疗性生物医药与临床诊断试剂中的新兴力量。相比于常规抗体,纳米抗体的优势有:
1.分子量小,可穿透血脑屏障;
2.原核或真核系统中高表达;
3.特异性强,亲和力高;
4.对人的免疫原性弱。
纳米抗体文库构建与固相淘选技术路线如下:
纳米抗体文库构建与淘选示意图
噬菌体展示技术的优点
噬菌体展示技术(Phage Display)是一种基因表达产物和亲和选择相结合的技术,以改造的噬菌体为载体,把待选基因段定向插入噬菌体外壳蛋白质基因区,使外源多肽表达展示噬菌体表面,进而通过亲和富集法表达多肽或蛋白质的噬菌体。
噬菌体展示技术作为一种新兴的高通量筛选技术,在基因工程抗体的制备、疾病诊断和治疗以及蛋白质间相互作用等研究领域已经广泛应用,如:
1、随机肽库,抗体库、蛋白质突变体库的构建;
2、模拟抗原表位的筛选(Screening)等。
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文献和实验在骆驼科动物外周血液中存在一种天然缺失轻链的抗体,该抗体只包含一个重链可变区(VHH)和两个常规的 CH2 与 CH3 区,不像人工改造的单链抗体片段 (scFv) 那样容易相互沾粘,甚至聚集成块。单独克隆并表达出来的 VHH 结构具有与原重链抗体相当的结构稳定性以及与抗原的结合活性,是目前已知的可结合目标抗原的最小单位。VHH 晶体为 2.5nm,长 4nm,分子量只有 15KDa,由于其尺寸处于纳米级别,也被称作纳米抗体(Nanobody,Nb),听名字就很牛 B
l a m a ),提供更高抗体多样性;5)超高品质:插入正确率 100%,序列正确率 97%,随机选取 200 个克隆测序,均无重复序列。6)普健生物也可提供噬菌体展示纳米抗体文库构建及淘选一站式技术服务,服务内容及周期如下: 案例展示普健生物构建了千亿级纳米抗体 VHH 文库,淘选了针对新冠 NTD domain 的纳米抗体,获得了 9 条 VHH 序列,并采用哺乳系统进行了 9 条 VHH-Fc 的重组表达,9 条 VHH-Fc 序列的表达量均较高。
Western Blot 实验 通过SDS-PAGE胶将不同的分子量的蛋白分离开,将目标蛋白转移到PVDF膜上,再利用抗原抗体的特异性结合,用特异性的一抗结合目标蛋白,用HRP标记的二抗结合一抗,再加以ECL发光液显色,检测目的蛋白在不同处理的样本中表达量的高低变化 服务优势及实验服务流程: 1、利用高性能试剂配合高通量全自动western blot机,提供超高灵敏性的western blot实验服务。超高灵敏度最低至15飞克抗原。 2、一抗的寄送需要泡沫盒加冰袋低温即送
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