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- 2025年07月16日
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艾柏森（生物）科技有限公司
抗体亲和力检测
非标记（Label-free）交互分析是科学家用于研究生物分子之间相互作用的重要方法，艾柏森生物研究团队可运用先进的Biacore、 ProteOn和octet系统对抗体的亲和力和动力学进行测量。这些系统主要基于光学效应的技术－表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)和生物膜层表面干涉技术（bio－layer interferometry, BLI），可直接检测分子间相互作用并进行实时监测。
亲和力动态测定方法-表面等离子共振法（SPR）是一种生物大分子相互作用分析（biomolecular interaction analysis, BIA）技术，这种技术基于表面等离子共振的物理光学现象的生物传感分析技术，不必使用荧光标记或同位素标记，从而让保持了生物分子的天然活性，而且可实时检测抗原-抗体等生物大分子相互作用的全过程。
SPR光谱可以实时监测传感芯片表面液相折射率的变化，而这一变化和传感芯片表面所结合的生物分子的质量成正比，用共振单位（Response unit，RU）相对时间来表示。因此，通过分析反应过程中各时刻的SPR光谱，可在非标记的情况下监测生物分子间的相互作用。
SPR技术特点：
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Lable-Free技术，无需利用荧光素、同位素等分子检测
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Real-Time技术，可直接、实时监测相互作用的全过程
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获得分子相互作用的亲和力及热动力学信息
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光路不经过样品，不受样品颜色影响
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样品消耗低，自动化程度高
结果交付：
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亲和力报告（定量分析）：结合常数（Ka）、解离常数（Kd）和亲和常数（KD）
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电子图片&完整实验报告，包括实验步骤、使用试剂、仪器、软件检索参数等
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文献和实验抗体亲和力描述的是抗原表位与抗体分子抗原结合部位之间的互补情况，体现两种分子间吸引力与排斥力间的平衡与消长。亲和力可以用抗原-抗体复合物的形成量与游离抗原加游离抗体量的比值作定量评估，即计算两者间的平衡常数。 抗原-抗体结合的亲和力及其测定原理 图上方表明亲和力高低由分子间吸力和斥力间的消长所决定；下方为定量评估亲和力的平衡常数计算原理 生发中心微环境中进人中央母细胞阶段的活化B细胞，重链和轻链的V区基因可发生高频
指抗体的抗原结合簇同抗原的抗原决定簇的结合强度。通常以半抗原及其相对的抗体作试料，用平衡透析法进行检定。即以下式的结合常数 K为亲和力 [ ]表示克分子浓度（ mol／ 1）， Ab为抗体， H为半抗原， Ab— H表示抗体与半抗原的结合物。其值越大， Ab HAb— H的反应越向右侧进行，而亲和力就变强。实际上抗体是保有各种强度亲和力的抗体分子集团，故假如在平衡透析法方面求得抗体全部结合簇的一半处于与抗原结合状态的结合常数为 K
ELISA 检测噬菌体抗体与目的抗原的亲和力 【材料和试剂】 （1）酶标板 （2）酶标仪 （3）0.5mol/L Na2CO3(pH9.6) （4）1％BSA （5）HRP标记的抗M13噬菌体多抗 （6）2mol/L H2SO4 【操作步骤】 (1)将抗原用PBS或0.5mol/L Na2CO3(pH9.6)稀释至10μg/ml; (2)对于要检测的每个克隆,至少包被2个孔,每孔用200μl稀释抗原。同时包被阴性对照抗原。此外,包被阳性
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