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SatI (Fnu4HI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1641
  • 2025年10月05日
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    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : G
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率60%
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer G 10X Buffer Tango™
    ER1641 200 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER1641
    ER1642 1000 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER1642
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    G 37°C 20-50 100 20-50 20-50 50-100 20-50 1X or 2X

    Lambda DNA
    1.4%琼脂糖
    380 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液G:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    SatI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍SatI过量酶切后,超过60%的酶切产物可连接(10-30 u T4 DNA连接酶/1 μg酶切DNA),超过90%的连接产物可以重新酶切。

    备注
    SatI (Fnu4HI) 有效酶切要求底物DNA分子中至少有2个识别位点。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    兼容性末端
    GC^SGC – BcnI, Bme1390I;
    GC^WGC – MvaI, Bme1390I。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 阻止酶切。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 无重叠 – 不影响。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...Gm5C G GC...3'
    3'...C Gm5C CG...5'

    阻止酶切
    CpG

    5'...GCNGm5C G ...3'
    3'...CGNC Gm5C ...5'

    阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    0 50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    380 31 17 42 19 19
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    20 20 23 23 19 37

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