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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD1644 | 20 µl (20 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD1644 | |
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 5 | 5 | 10 | 5 | 3 | 65°C, 5 min | 16 |
Lambda DNA
1.4%琼脂糖
380 切割位点
1 µl FastDigest® Fnu4HI (SatI)可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 10分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
备注
GC^WGC – FastDigest® MvaI, FastDigest® ScrFI (Bme1390I), Bme1390I, MvaI, ScrFI。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| CpG | 5'...Gm5C G GC...3' |
阻止酶切 |
| CpG | 5'...GCNGm5C G ...3' |
阻止酶切 |
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 380 | 31 | 17 | 42 | 19 | 19 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 20 | 20 | 23 | 23 | 19 | 37 |
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文献和实验Fab-TACS® Gravity column 细胞分选重力柱应用实例Fab-TACS 技术简介Fabs-TACS 无痕亲和细胞分选技术(traceless affinity cell selection, Fab-TACS),以 Fab 片段为基础,基于 IBA Lifesciences 独家的 Strep-tag®/Strep-Tactin® 蛋白纯化系统,进一步发展而来。Fab-TACS 运用免疫亲和层析的原理,使用细胞表面抗原分子 CD marker 中的 Fab 片段,进行捕捉
- 3) 及 CD45 -PE (HI30,白细胞标志) 抗体染色后,进行流式分析,死细胞以 DAPI 染色先行排除,左右分别为分选前后的细胞群分布。 总结: 几次实验的结果,使用 Fab-TACS® Gravity column 来从全血直接进行 CD3+ T 细胞分选,平均得率为 84.5%,纯度大于 90%,细胞存活率高于 95%,且目标细胞不含标记,贴近天然,使下游实验更精确。
物,将siRNA和细胞内mRNA结合到一起,激活裂解机制(可能是内切核苷酸的),释放mRNA并进行降解。 6、shRNA 短的发夹RNA (Short hairpin RNA)也称短的干扰发夹 (short interfering hairpin);在体内通过RNAi降低互补序列基因的表达。 7、Pol III 启动子 Pol III 启动子 U6或者HI(Pol III promoter,U6 or HI),通常用来驱动shRNA的产生。Pol III 启动子具有在某一确定起始位点上游启动
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