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- Thermo scientific -fermentas
- ER0551
- 2025年10月01日
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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X Buffer R | 10X Buffer Tango™ | ||||
| ER0551 | 2000 u (10 u/µl) | 1.00 ml | 1.00 ml | ER0551 | |
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| R | 37°C | 20-50 | 20-50 | 50-100 | 100 | 20-50* | 100 | 1X* or 2X |
Lambda DNA
1.4%琼脂糖
71 切割位点
10 mM Tris-HCl (pH 8.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.1 mg/ml BSA。
37°C酶切。
10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 400 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
备注
- 低盐、高浓度甘油(>5%)或过量酶切会导致星活性。
- 与其异功酶EcoRII不同，MvaI无需多个拷贝识别位点就能实现有效酶切。
Dcm: 完全重叠 – 不影响。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dcm (CCWGG) | Cm6CWGG |
不阻止酶切 |
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 0 | 20-50 | 50-100 | ||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 71 | 2 | 7 | 6 | 5 | 5 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 5 | 5 | 5 | 5 | 8 | 12 |
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文献和实验水浴等。[实验试剂]限制性内切酶BstNI、模板DNA、Taq聚合酶、PCR引物（上游引物:5－CTAAGCCTTCCCTTTATCACC－3’；下游引物：5－TTCACAGTCGTGCTTGTTTCT－3’）、丙烯酰胺、酶消化缓冲液、电极缓冲液、上样缓冲液等。[实验方法]1.PCR扩增：PCR反应体系为20μl，含模板2μl(约50ng)，引物各1.6μl，dNTP1.6μl(0.4mM)，10×Buffer缓冲液2μl，Taq酶0.5U，加双蒸水至20.0μl；PCR反应条件为95℃2min，94℃30
Cleavage Efficiency Close to the&nbs
20 50-100 MssI 20-50 50-100 MunI 20-50 50-100 MvaI 0 20-50 50-100
Cleavage Efficiency Close to the Termini of PCR Fragments
20 50-100 MssI 20-50 50-100 MunI 20-50 50-100 MvaI 0 20-50 50-100
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