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FastDigest® NotI

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  • Thermo scientific -fermentas
  • FD0593
  • 2025年09月29日
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      大量

    • - 推荐的缓冲液 : FastDigest®缓冲液
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - CpG甲基化可能影响DNA切割
    • - 热失活80°C, 5 min
    • - 蓝/白鉴定
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X FastDigest® Buffer 10X FastDigest® Green Buffer
    FD0593 20 µl (20 react.) 1.00 ml 1.00 ml FD0593
    FD0594 50 µl (50 react.) 1.00 ml 1.00 ml FD0594
    FD0595 150 µl (150 react.) 1.00 ml 1.00 ml FD0595
    FD0596 250 µl (250 react.) 1.00 ml 1.00 ml FD0596
    Reaction conditions
    Reaction temperature Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min bp from end of DNA required for complete digestion Thermal inactivation Incubation time without star activity, hours
    Lambda, 1µg/20µl Plasmid DNA, 1µg/20µl PCR product, ~0.2µg/30µl Genomic DNA, 1µg/10µl
    37°C no sites
    (pTZ19RJL2 DNA/BseLI,
    5 min)
    30 5 10 2 80°C, 5 min 16

    pTZ19RJL2 DNA/BseLI片段
    1.7%琼脂糖
    1 切割位点

    配方
    1 µl (1 FDU)是指在37°C,1X FastDigest® 缓冲液中5分钟内酶切1 µg pTZ19RJL2 DNA-BseLI片段所需的酶量。

    推荐反应条件
    1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液,37°C。
    1 µl FastDigest® NotI可在
    – 5分钟内酶切1 µg pTZ19RJL2 DNA/BseLI片段;
    – 30分钟内酶切1 µg质粒DNA;
    – 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
    – 10分钟内酶切1 µg基因组DNA或60分钟内酶切5 µg基因组DNA。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    兼容性末端
    FastDigest® Bsp120I, FastDigest® EagI (Eco52I), Bsp120I, CfrI, Eco52I。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 无重叠 – 不影响。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    GCGGCCGC

    阻止酶切
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    0 0 0 0 0 0
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    0 0 1 1 0 0

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