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Eam1104I (EarI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER0231
  • 2025年09月24日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : Tango™
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - 基因组级别
    • - 重组酶
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer Tango™
    ER0231 300 u (10 u/µl) 1.00 ml ER0231
    ER0232 1500 u (10 u/µl) 1.00 ml ER0232
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    Tango™ 37°C 50-100 50-100 0-20 0-20 100 0-20 1X

    Lambda DNA
    1.0%琼脂糖
    34 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液Tango™:
    33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    Eam1104I保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50%�v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍Eam1104I过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    琼脂糖包埋DNA酶切
    至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。

    备注
    λλ DNA上的有些位点很难被Eam1104I切割,其原型酶Ksp632I也是如此。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 不影响。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...CTCTTm5C G ...3'
    3'...GAGAA Gm5C ...5'

    不阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    0 50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    34 2 2 2 3 3
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    3 3 3 3 2 1

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    图标文献和实验
    相关实验
    • FA1104型电子天平标准操作规程

      1、安装:① 拆箱后,除去一切包装,取出风罩内缓冲海绵,装好称盘。② 将天平放置稳定的工作台上,避免振动、阳光照射和气流。③ 工作环境温度10~30℃,温度波动不大于5℃/h,相对适度:④ 工作电压:220V,50Hz。2、操作:在使用前观察水平仪,如水平仪水泡偏移,需调整水平调节脚,使水泡位于水平仪中心。本天平采用轻触按键,能实行多功能键盘操作,操作灵活方便,各功能的转换和选择,只需按相应当按键。① 开机:选择220V,50Hz电压。天平接通电源,就开始通电工作,通常需预热1小时后开启显示

    • FA1104型电子天平标准操作规程(SOP)

      目的:制定FA1104型电子天平的使用标准操作规程,确保操作的规范性、正确性,结果的可靠性。1、 使用前准备1.1 使用之前,要预先向管理人员做好预约,做好使用登记。1.2 称重工作台前一定要保持平稳牢固可靠。1.3 用水仪调整调整电子天平:电子天平升高,调节右旋前面地脚;电子天平下降,调节左旋前面地脚。在电子天平使用地点调整地脚螺栓的高度,使水平仪内的空气泡正好位于圆环的中央。1.4 插上电源并接通电源(220V/50Hz)。1.5 天平通电后,应进行预热,时间不低于30分钟。1.6 开机

    • SELDI系统的简介和操作流程(图)

      蛋白质样品中的一个特定亚群将通过简单的化学作用或者蛋白质相互作用被芯片捕获。 步骤三:未结合成分的洗脱 孵育后,未结合的蛋白和其他成分从芯片表面洗脱掉。只有那些特异性结合的蛋白质才保留下来用于进一步的分析。这种选择性的洗脱进一步选取基于芯片特色的蛋白质集合。 步骤四:在SELDI蛋白质阅读机上进行分析 在洗脱步骤之后,点加上含有能量吸收分子(EAM)的有机溶液。EAMs对样品的离子化起关键作用。在蛋白质溶解到含有EAM的溶液之后,溶液挥发掉,在芯片表面形成蛋白质和EAMs的共结晶

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