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Cfr9I (XmaI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER0171
  • 2025年09月24日
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      大量

    • - 推荐的缓冲液 : Unique缓冲液
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - CpG甲基化可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - 基因组级别
    • - 重组酶
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer Cfr9I 10X Buffer Tango™
    ER0171 300 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER0171
    ER0172 1500 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER0172
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    Cfr9I 37°C 0-20 0-20 0-20 0-20 20-50 0-20 1X

    Lambda DNA
    0.7%琼脂糖
    3 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液Cfr9I:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.2, 37°C), 5 mM MgCl2 , 200 mM谷氨酸钠和0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    Cfr9I保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 250 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍Cfr9I过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    琼脂糖包埋DNA酶切
    至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。

    备注
    完全酶切要求反应体系中DNA的浓度不能小于50 μg/ml。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    兼容性末端
    BshTI, BsaWI, Cfr10I, Eco88I, Kpn2I, NgoMIV, SgrAI。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 无重叠 – 不影响。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    CCCGGG

    部分影响
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    20-50 50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    3 0 1 0 1 1
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    1 1 1 1 1 0

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    图标文献和实验
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