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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD1764 | 50 µl (50 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD1764 | |
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 5 | 15 | 5 | 20 | 3 | 80°C, 5 min | 16 |
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
13 切割位点
1 µl FastDigest® BfaI (FspBI)可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 15分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 20分钟内酶切1 µg基因组DNA或180分钟内酶切5 µg基因组DNA。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dam (GATC) | 5'...CTAGm6A TC ...3' |
不阻止酶切 |
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 13 | 3 | 5 | 5 | 4 | 4 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 5 | 5 | 6 | 6 | 4 | 4 |
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文献和实验,可溶解TrueGel3D™水凝胶以回收活细胞或化学固定细胞。例如,30 μL凝胶可用培养基1:20稀释的300 μL TrueGel3D™酶促细胞回收液溶解(37 °C孵育30-60分钟)。凝胶溶解后,细胞悬液离心,并用新鲜培养基或生理缓冲液重悬沉淀细胞。重复此洗涤步骤一两次,去除残留的TrueGel3D™酶促细胞回收液。如若细胞要再次进行葡聚糖水凝胶包埋并继续培养,除酶操作尤其重要。如果TrueGel3D™酶促细胞回收液没有彻底清除,会使新形成的水凝胶不稳定。 凝胶多样化制备的细节变动 制备
【原创】山寨Stratagene“QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kits”实验方案
, Fermentas) 1.6 ul Incubate at 37° for 3-4 h. 4. Transformation into E. coli The digested PCRs were purified by Cycle-pure Kit (Omega, China), the PCRs were eluted with 20 μl Nuclease-free water. Add 10 ul of digested PCRs into 100 ul DH
录酶是实验室中首批用于 cDNA 合成的酶之一。该酶是一种分子量为 170-kDa 的异二聚体,最佳反应温度范围为42-48℃。AMV 反转录酶具有较强的 RNase H 活性,可降解 RNA:cDNA 复合物中的 RNA,获得的 cDNA 片段较短( MMLV 反转录酶因具有单体结构而成为常用的替代品,可对重组酶进行更简单的克隆和修饰。MMLV 反转录酶是一种分子量为75 kDa 的酶,反应温度约为37°C。虽然 MMLV 的热稳定性低于 AMV 反转录酶,但其 RNase H 活性较低,因此具有
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