Thermo scientific BseMII (BspC

100%酶活性的反应条件

[1X 缓冲液Tango™] + SAM：
[33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA] + 0.01 mM S-腺苷甲硫氨酸。
55°C酶切。

保存缓冲液

BseMII保存在：
10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

连接和重新酶切

10倍BseMII过量酶切后，超过90%的酶切产物可连接，但是由于识别位点甲基化，连接产物不能重新酶切(见备注)。

备注

• 37°C酶切时只有30%的酶活性。
• 酶活性需要SAM。酶切时可用Sinefungin替代SAM，此时DNA不会被甲基化修饰，超过95%的连接产物可以被该酶重新酶切。

商业化同裂酶

采用REsearch™软件寻找同功酶。

双酶切

采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

甲基化影响

Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。