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BseLI (BslI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1201
  • 2025年09月19日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : Tango™
    • - 孵育温度55°C
    • - 连接效率95%
    • - Dcm甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 80°C加热20分钟不会使酶失活
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer Tango™
    ER1201 500 u (10 u/µl) 1.00 ml ER1201
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    Tango™ 55°C 20-50 100 0-20 20-50 100 50-100 1X or 2X

    Lambda DNA
    1.4%琼脂糖
    176 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液Tango™:
    33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
    55°C酶切。

    保存缓冲液
    BseLI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍BseLI过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    备注
    • 37°C酶切时只有40%的酶活性。
    • 重叠的Dcm甲基化阻止BseLI酶切。为避免Dcm甲基化的影响,样本DNA需从dam-, dcm- 菌株中抽提,如GM2163 (#M0099)。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 可能重叠 – 部分影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 无重叠 – 不影响。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    Dcm (CCWGG)

    5'...Cm5CW GG (N)4 GG...3'
    3'...G GWm5CC (N)4 CC...5'

    部分影响
    Dcm (CCWGG)

    5'...Cm5CW GG NCm5CW GG ...3'
    3'...G GWm5CC NG GWm5CC ...5'

    阻止酶切
    CpG

    5'...Cm5C G (N)6 GG...3'
    3'...G Gm5C (N)6 CC...5'

    部分影响
    CpG

    5'...Cm5C G (N)5m5C G G...3'
    3'...G Gm5C (N)5 Gm5CC...5'

    阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    0 50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    176 19 17 20 6 6
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    7 7 8 8 8 21

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