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- 英文名:
Random Hexamer Primer
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大量
- 规格:
100 mL
- Applications
- 第一链cDNA合成。
引物提供形式为即用型20倍浓缩液。
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| Catalog# | Size, concentration | Certificate of Analysis | MSDS |
| SO142 | 120 µl (24 µg) | SO142 | Select English English-USA German French Lithuanian |
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文献和实验Ullrich, N., Schröder, A., Jantsch, J. et al. The role of mechanotransduction versus hypoxia during simulated orthodontic compressive strain—an in vitro study of human periodontal ligament fibroblasts. Int J Oral Sci 11, 33 (2019).
包括 3' 末端的多义碱基,如 dN(dA,dT,dG或dC)和 dV(dG,dA或dC)。该修饰可防止 poly(A)滑移,并且将起始位点锁定在 poly(A)尾的上游位置。这些引物被称为锚定oligo(dT)。 ❖ 随机引物是具有随机碱基序列的寡核苷酸,通常由 6 个核苷酸组成,被称为随机六聚体、N6 或 dN6。由于随机引物的随机结合(即没有模板特异性),其可以退火到样本中的任何类型 RNA。因此,这些引物被认为可以用于无 poly(A)尾结构(如 rRNA、tRNA、非编码 RNA
的 TAQ 聚合酶。 cDNA 第一条链的合成可用不规则六聚体、寡聚(dT)或 PCR 下游引物来启动反应。 如果用寡聚(dT),一般每次反应加 0.1μL 就够了。如果用下游寡核苷酸作为第一条链 的起始引物,10-50pmol 最为理想。反转录反应以后,加入适量的上游和下游引物进行 PCR 反应与用不规则六聚体方法一样。 三种启动方法中无论用那一种最后得到的扩 增产物都同样理想。而加入不规则六聚体似乎更容易得到前后一致的结果,且靶序列 的合成量通常最多(E.S.K.)加入不规则六聚体方法一样。三种
包含逆转录抑制剂 通过乙醇沉淀 RNA 除去抑制剂。用 70%(v/v)乙醇对 RNA 沉淀进行清洗。可以加入糖元(0.25 μg 到 0.4 μg/μl)以帮助小量样品 RNA 的恢复。 逆转录抑制剂包括:SDS,EDTA,甘油,焦磷酸钠,亚精胺,甲酰胺和胍盐。将对照 RNA 同样品混合,同对照 RNA 反应比较产量以检验抑制剂。 多糖同 RNA 共沉淀 使用氯化锂沉淀 RNA 以除去多糖。用于合成 cDNA 第一链合成的引物没有很好退火。确定退火温度适合
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