BcuI (SpeI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1251
  • 2025年11月05日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : Tango™
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率80%
    • - 80°C加热20分钟不会使酶失活
    • - 基因组级别
    • - 蓝/白鉴定
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer Tango™
    ER1251 400 u (10 u/µl) 1.00 ml ER1251
    ER1252 2000 u (10 u/µl) 1.00 ml ER1252
    ER1257 200 u (10 u/µl) 1.00 ml
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    Tango™ 37°C 50-100 50-100 0-20 20-50 100 0-20 1X

    Ad2 DNA
    0.7%琼脂糖
    3 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液Tango™:
    33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    BcuI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 300 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍BcuI过量酶切后,超过80%的酶切产物可以连接,超过90%的连接产物能重新酶切。

    琼脂糖包埋DNA酶切
    至少需要10 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的Adenovirus-2 DNA。

    备注
    分析底物为含有BcuI识别位点插入的 pUC19 DNA。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    兼容性末端
    XmaJI, Eco130I, NheI, XbaI。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 无重叠 – 不影响。
    EcoKI: 可能重叠 – 影响不确定。
    EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。

    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    0 0 0 0 0 0
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    0 0 1 1 0 0

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