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RNase I

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  • 2025年11月05日
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    • - 热失活100°C, 30 min
    • - 重组酶
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Certificate of Analysis MSDS
    EN0601 1000 u (10 u/µl) EN0601
    EN0602 5000 u (10 u/µl) EN0602
    Features

    • 多种反应条件下保持活性和稳定。
    • 100°C加热30分钟可使酶失活。
    Applications

    • 除去DNA溶液中的RNA (2)。
    • 除去重组蛋白抽提物中的RNA。
    • 核糖核酸酶保护分析(3)。
    说明
    Ribonuclease I (RNase I) 是一种内切核糖核酸酶,优先降解单链RNA。通过形成中间体核苷2’-,3’-环磷酸将RNA降解成核苷3’-单磷酸,见图1 (1)。

    该酶发挥活性无需金属离子参与。


    来源
    大肠杆菌细胞,含有克隆的rna 基因。

    分子量
    29.6 kDa,单体。

    活性单位定义
    1个活性单位是指在37°C、每秒钟内将大肠杆菌核糖体RNA降解成酸性可溶的核苷酸所需的酶量。

    酶活性分析混合物:20 mM Tris-acetate (pH 8.0), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.01% (v/v) Triton X-100, 40 µM E.coli 核糖体[3 H]-RNA。


    保存缓冲液
    保存缓冲液组分:
    50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM NaCl, 0.01% (v/v) Triton X-100和50% (v/v)甘油。

    质量控制
    相关测试表明无内切脱氧核糖核酸酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。

    抑制与失活
    • 抑制剂:0.1%浓度的SDS不可逆地使该酶失活。
    • 失活:100°C加热30分钟可使酶蛋白失活,最保险的方法是采用过柱纯化或苯酚/氯仿抽提除去该酶。

    备注
    • 哺乳动物核糖核酸酶抑制剂对RNase I 无效。
    • RNase I 与DNA结合,不降解DNA。
    • RNase I 氨基酸序列在RNase T2家族中非常典型。
    • 非离子型变性剂(如Triton X-100)不抑制RNase I活性,甚至会轻微地刺激该酶活性并增进其对热失活的稳定性。对于高度稀释的溶液,Triton X-100或BSA(0.1�mg/ml)会保护RNase I使之不会粘附在玻璃管壁上。
    • 聚酰胺刺激RNase I 活性。


    图1。RNase I 活性。

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