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Lambda Exonuclease

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  • Thermo scientific -fermentas
  • EN0561
  • 2025年11月05日
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      大量

    • - 热失活80°C, 15 min
    • - 重组酶
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Reaction Buffer
    EN0561 1000 u (10 u/µl) 1.00 ml EN0561
    EN0562 5000 u (10 u/µl) 5 x 1.00 ml EN0562
    Features

    • 在Fermentas公司的PCR缓冲液中有活性。
    Applications

    • 产生单链PCR产物,应用于:
      一 DNA测序(3);
      一 分析DNA单链构型多态性(SSCP) (4)
      一 滚环复制。
    • 从双链DNA片段中制备单链DNA。
    • PCR产物克隆(5)。
    说明
    Lambda Exonuclease是一种具有高持续能力的5’=>3’外切脱氧核糖核酸酶,选择性切割双链DNA的5’-磷酸化链,见图1。该酶对单链DNA和未磷酸化DNA的活性较低、对含有切刻的DNA无活性、对有缺口的DNA活性有限(1, 2)。

    来源
    大肠杆菌细胞,含有Lambda噬菌体来源的克隆基因exo

    分子量
    26 kDa,单体。

    活性单位定义
    1个活性单位是指在37°C、30分钟内从双链底物中水解释放10 nmol酸性可溶反应产物所需的酶量。

    酶活性分析混合物:67 mM glycine-KOH (pH 9.4), 2.5 mM MgCl2 , 0.1% (v/v) Triton X-100 和 20 µg/ml超声处理的E.coli [3 H]-DNA。


    保存缓冲液
    保存缓冲液组分:
    25 mM Tris-HCl (pH 8.0), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50 mM NaCl, 0.1% (v/v) Triton X-100和50% (v/v)甘油。

    10X 反应缓冲液
    670 mM glycine-KOH (pH 9.4), 25 mM MgCl2 , 0.1% (v/v) Triton X-100。

    质量控制
    相关测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染。功能测试方法为以双链PCR产物为模板制备单链DNA。

    抑制与失活
    • 抑制剂:对-氯汞基苯甲酸盐,低盐浓度(0.2 M KCl, 0.1 M NaCl)。
    • 失活:80°C加热15分钟。

    Notice
    Use of this enzyme in certain applications may be covered by patents and may require a license.


    图1。Lambda Exonuclease活性。

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