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KK6011
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充足
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Kapa biosystems
- 规格:
1250 units
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
(4)。 一个韦氏单位=67个粘端连接活性单位。 浓度:400,000 units/ml和2,000,000 units/ml。 贮存条件: 50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.4), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 µg/ml BSA和50%的甘油,-20°C贮存。 热失活条件: 65°C 加热10分钟。 室温连接反应:为方便起见,连接反应可以在室温(20-25°C)条件下进行。粘性末端连接:在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA
冻融。 5µl 10µl pGEM®-T 1µl 1µl PCR 产物(含有粘性A末端) 3µl(Maximum) 8µl(Maximum) T4 DNA Ligase(3 Weiss units/µl) 1µl 1µl 用Tip吹打混匀,室温×1h或4℃过夜 表格 15、pMD18-T连接体系 成份 10µl体系 20µl体系 2×Ligation solution I (内含buffer和连接酶) 应该按照每次用量分装,避免多次冻融。 5µl 10µl
Preparation of End-Labeled DNA Probes by Conventional Kinase for DNA Footprinting Analysis
Treatment 1. Add 20 μl of 10X CIP Buffer. 2. Add diluted CIP stock to the DNA such that the final concentration is approximately 0.2 Units CIP per μg DNA in a final volume of 200 μl (see Hint #4). 3. Incubate at 37°C
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