- ¥3800
- 天根
- 中国
- NG210-01
- 2025年11月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
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充足
- 供应商：
天根生化科技（北京）
- 规格：
500 U
T4 RNA 连接酶2（截短型）可特异性催化5'-P腺苷化的DNA或RNA与RNA的3'-OH连接。本产品不需ATP来发挥活性，但需要供体底物的5'-P腺苷化。通过对野生型蛋白的截短改造，使得本产品失去了对非腺苷化5'-P的DNA或RNA与RNA3'羟基的连接活性，因此，如果供体5'-P进行腺苷化修饰，那么应用本产品可特异性的将其连接到受体RNA的3'端，从而可最大限度的减少非目标连接产物的背景。本产品通过大肠杆菌重组表达。包含野生型蛋白的N端249个氨基酸残基，分子量约为30.5 kDa。
产品特点
1. 特异的催化5'-P腺苷化的DNA或RNA与RNA 3'-OH的高效连接，背景更低；
2. 蛋白比活性高，稳定性好。
适用范围
1. 在二代测序（NGS） 应用中， 主要用于miRNA文库构建中RNA的3'端接头的连接。
2. 5'-P腺苷化的DNA或者RNA标签与任何种类RNA的3'端连接。
单位定义
在1×T4 RNA Ligase 2, Truncated Buffer反应液中，20 μl反应体系下，37℃，30 min内使0.4 μg等摩尔比的5'FAM标记的17 nt单链RNA与5'腺苷化的18 nt单链DNA连接50%时，所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。
酶蛋白性质描述
| 性质 | 蛋白描述 |
| 蛋白纯度 | >99% |
| 酶活性 | 30,000 U/mg |
| 单链核酸外切酶 | 50 U酶中，＜5.0% |
| 双链核酸外切酶 | 50 U酶中，＜1.0% |
| 双链核酸内切酶 | 50 U酶中，未检出 |
| 宿主基因组污染 | 50 U酶中，＜10拷贝 |
| 非特异性RNase残留 | 50 U酶中，未检出 |
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多，也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题，就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与，如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
使RNA的 3′－ OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6． 5． 1． 3．是 J． Hurwitz等（ 1972）从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的，与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理，首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体，复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键，它与 RNA的 3′－ OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
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