HiFi

科研锦鲤，你准备好了吗？

结果并非如此。如果大家需要使用热启动酶，建议向厂商索取的检测数据（如分子信标法检测，Ma et al., Anal Biochem, 2006），以证明其确实具有热启能力。2. 保真性保真性就是扩增过程中的错配率，对于 cDNA 克隆、文库构建的老师来说是尤为重要的参数。Taq 酶的保真性较低，而 Pfu、HiFi 等高保真酶具有 3’-5’ proofreading 功能，可以校正错配，保真度较高。保真性高于 Taq 酶 50 倍左右是比较常见的数值。我们也可以用 Lac I 分析的经典方法自己检测一下

6 篇 Science 齐发！首次破译完整的人类基因组，百人科学家团队揭开背后的神秘面纱

了一部分空白。随着 DNA 测序成本的大幅下降和对新 DNA 测序技术的投资增加，新的 DNA 测序技术不断出现，可以在保证准确性的情况下读取更长的 DNA 序列。 长读测序技术被证明是既有规则的「改变者」，是绘制人类完整基因组的必备工具。其中，Oxford Nanopore DNA （牛津纳米孔）测序技术可以一次读取长达 100 万个碱基的序列，精度适中；PacBio 公司开发的 HiFi 测序技术可以读取超过 20Kb，准确度在 99.9% 以上的测序序列。研究者利用两者的优势互补来完成

【求助】4 kb片段连接pcDNA3.1+的问题

含有这两种酶切位点序列。 已经开始进行ta克隆 如楼上战友所述，TA克隆的确是长片段亚克隆的好的手段。我最初开始学习构建质粒的时候也是先上TA，不过我们实验室一直使用一种KAPA HIFI readymix的酶，效果很好，保真性也非常非常高，就是做TA的时候比较麻烦，需要把PCR产物纯化回收后再加一次A tail，而就是这一步我感觉一直没有摸索到最优化稳定的条件，所以每次加A后连pCR2.1 转化的结果都不稳定，有时候长的多有时候长得少，之前曾经就这个问题发帖