- ￥1600
- KAPA Biosystems
- 美国
- KK2102
- 2026年04月11日
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- 保存条件：
-20
- 保质期：
-
- 英文名：
HiFi
- 库存：
1111
- 供应商：
北京普凯瑞生物科技有限公司
- 规格：
250 units
产品简介
KAPA HiFi高保真DNA聚合酶是二代基因工程酶，分热启动和非热启动版，保真性强，活力超高，与其他高保真酶相比具有行业领先的性能。该酶扩增基因组可达15kb，扩增质粒或噬菌体DNA可达18kb。热启动配方中，酶是结合在一个特定的载体上，使其在第一步变性之前一直保持灭活的状态。这样就消除了反应设定和启动过程中非特异性启动导致的产物扩增，进而增加了整体反应的效率和灵敏度。
产品优势
1）超高保真，通过大规模二代测序得出的出错率：2.8×10-7；
2）可以扩增各种复杂模板；
3）扩增片段长,扩增基因组可超过15kb；
4）扩增速度快,节省75%以上的时间；
5）KAPA高保真热启动酶，含有2种buffer，分别用于常规模板和高难度模板。
产品应用
1）高保真PCR；
2）基因定点突变；
3）测序；
4）蛋白表达。
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文献和实验结果并非如此。如果大家需要使用热启动酶，建议向厂商索取的检测数据（如分子信标法检测，Ma et al., Anal Biochem, 2006），以证明其确实具有热启能力。2. 保真性保真性就是扩增过程中的错配率，对于 cDNA 克隆、文库构建的老师来说是尤为重要的参数。Taq 酶的保真性较低，而 Pfu、HiFi 等高保真酶具有 3’-5’ proofreading 功能，可以校正错配，保真度较高。保真性高于 Taq 酶 50 倍左右是比较常见的数值。我们也可以用 Lac I 分析的经典方法自己检测一下
一家小公司的产品，不过实验室一直用，效果一直有保证，同期进行连接的其他同学也都连接成功。 结果： 转化后，平板上均有数量不等的菌落产生，少时4-5个，多时10来个。摇菌扩增8 h，进行菌液PCR检测（含阳性对照），检测组无阳性结果，但一直在1000 bp左右出现较弱条带，阳性组正常。提取质粒后，10 μl体系双酶切2 h，竟然在2000 bp和3000 bp处出现较弱条带（比Marker稍暗）。 特此悬赏10个叮当，请高手指点迷津。
还是老板亲自动手演示了一遍，学到正宗的克隆技术，才得以成功。关于你的这个克隆，我的意见如下： 1）选用好一点的聚合酶，保证序列的保真性。我们一直使用一种叫做KAPA HIFI READYMIX的酶，很方便，扩增能力和保真度都超级好。普通的taq酶扩增长片段容易出错，反而浪费时间和试剂。 2） 如果直接酶切PCR产物，请确保你的上下游引物5'端已经引入合适的酶切位点和保护碱基（非常重要），我当时选用的是XhoI和HindIII这两个位点。 3）凡是用来做克隆的DNA产物，跑胶一定
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