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天根生化科技(北京)
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文献和实验后都只是平端产物。这种平端克隆往往效率低,并且有非特异性背景菌落产生,造成筛选困难。Topo平端克隆主要改良载体设计,把ccdB (Control of cell death)基因并入到mcs中,如果没有DNA片断插入,ccdB基因则会表达,ccdB基因的表达蛋白,会破坏细菌的DNA gyrase,造成细菌染色体的降解导致细菌死亡。如果有插入片断,则ccdB基因表达受到阻碍,所以细胞可生长。这样可以把高背景的缺点改善,节省筛选的时间。Topo平端克隆与Topo TA方法一样,操作简单快速。Zero
PCR Cloning Kit)(Topo XL PCR Cloning Kit) 因为越来越多高确限度热稳定酶如Pfx、Pfu被用于PCR 扩增,使到PCR 后都只是平端产物。这种平端克隆 往往效率低,并且有非特异性背景菌落产生,造成筛选困难。 Topo平端克隆 主要改良载体设计,把ccdB (Control of cell death)基因并入到mcs中,如果没有DNA片断插入,ccdB基因则会表达
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品
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