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- 天根生化科技（北京）
- 中国
- vi102-01
- 2025年12月20日
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- 文献和实验
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充足
- 供应商：
天根生化科技（北京）
- 规格：
50次
产品简介：
重组菌落鉴定的方法有很多，为了兼顾鉴定的效率和准确率，很多科研人员选择使用PCR法鉴定重组菌落。其原理主要是选择合适的引物，根据灵敏的PCR扩增反应，将阳性宿主菌体内载体的目的片段扩增出来，方便地进行鉴定，无需进行菌体的过夜培养和质粒提取，大大地节省了时间和精力。
为了方便广大的科研人员，我们为您配备了专用于重组菌落鉴定的试剂盒，使用本公司研发的一管便携式PCR MasterMix预混系统，无需您一一加入各种成分，直接加入筛选到的单菌落，经过1小时左右的PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。
产品特点：
方便快捷：省去了菌体培养和提取质粒的时间与费用，快速简便地鉴定重组子。
准确灵敏：鉴定的准确度达90%以上。
保存条件：
-20℃保存2年
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文献和实验调节电压为 20V （小槽）或 40V （大槽），电泳 15min ，使细胞充分裂解，将电压调高到 200V ，继续电泳 1hr ，照相。 7 ．根据胶图粗略鉴定插入片段的大小及小片段率。 2 ．菌落 PCR 1．取适量PCR薄壁管，置于冰上，每管先加入17.3ul的灭菌水。 2．用灭过菌的10ul小枪头挑取单克隆白斑至灭菌水中， 振荡混匀。 3．依次加入
法，在涂布有IPTG和X-Gal的筛选平板上，重组菌株为白色，未转入重组质粒的菌株为蓝色。 ◆ 可对小量提取的质粒DNA做限制性酶切，采用天为时代公司的质粒提取试剂盒，可快速提取多个样本，而且由于提取的质粒纯度高，不会有酶切切不开，影响实验的情况。 ◆ 也可直接用细菌菌落进行PCR反应，筛选存在目的片段的重组菌落。天为时代公司生产的一管便捷式PCR反应系统（MasterMix系列产品）特别适合这种方法。用灭菌的吸头挑取单个菌落到已加入MasterMix的PCR管中，加入特异引物，进行
表达载体 挑选了60 个菌落，运用目的基因 的上下游引物 做PCR，出来条带的有有52个 按照经验选取比较亮的14 个提取质粒，酶切和PCR双鉴定 结果仅有一个为阳性克隆，其余均为假阳性（假阳性主要考虑来源于未与载体结合的插入片段 ） 也难怪老板一口回绝 只是我需要做的基因太多，最凶猛的时候我一个星期要用两个200次的TianGen的质粒小提，累死人不偿命 后来我自己对着图谱研究 了一下（我所使用的是pCDNA
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