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- 2025年07月08日
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大量
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上海羽朵
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100次
植物组织线粒体形态/活性荧光染色试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途
植物组织线粒体形态/活性荧光染色试剂是一种旨在通过长波长的荧光染料特异性地聚集在线粒体，并呈现红色，用于分析和观察线粒体活性与形态以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于新鲜植物组织（例如根尖等）线粒体的形态观察、活性探测和定位标记。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定， 滞留持久。
技术背景
线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。线粒体大量存在于代谢旺盛的细胞中， 在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。线粒体荧光探针 MitoTracker RED，是一种含有硫醇（Thiol）氯甲基基团的荧光染料，自由通过细胞膜，选择性地聚集在线粒体。它可以对活细胞进行直接染色，在 580nm 波长可以清晰看到被染成红色的线状或颗粒小体的线粒体。并可以分析线粒体膜电位，以检测线粒体活性。
产品内容
清理液（Reagent A） 毫升
固着液（Reagent B） 毫升
离析液（Reagent C） 毫升
预备液（Reagent D） 毫升
染色液（Reagent E） 微升
产品说明书 1 份
保存方式
保存 染色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在 4℃冰箱里； 固着液（Reagent B）和 离析液（Reagent C）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证 6 月
用户自备
1.5 毫升离心管：用于染色液配制的容器载玻片：用于组织置放染色
解剖针：用于植物组织解剖培养箱：用于染色孵育
（共聚焦）荧光显微镜：用于细胞荧光分析
实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的 染色液（Reagent E）置入冰槽里融化，然后分别移出xx 微升 预备液（Reagent D）和xx 微升 染色液（Reagent E）到新的 1.5 毫升离心管，标记为 染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。
方法一：活体染色
1、 加上xx 微升 清理液（Reagent A）在载玻片上
2、 切取新鲜植物根尖，放进载玻片上的 清理液（Reagent A）中
3、 用解剖针小心压碎根尖
4、 小心移去 清理液（Reagent A）
5、 小心加上xx 毫升 清理液（Reagent A）在根尖上
6、 小心加入xx 微升含有 预备液（Reagent D）和 染色液（Reagent E）的
染色工作液
7、 放进 37℃培养箱里孵育 20 分钟8、 取出载玻片，移去染色液
9、 小心加上xx 毫升 清理液（Reagent A）
10、小心移去 清理液（Reagent A）
11、盖上盖玻片，用拇指小心且垂直加压
12、即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长 579nm，散发波长 599nm（线粒体呈现红色） 方法二：固定染色
- 加上xx 微升 清理液（Reagent A）在载玻片上
- 切取新鲜植物根尖，放进载玻片上的 清理液（Reagent A）中
- 用解剖针小心压碎根尖
- 小心移去 清理液（Reagent A）
- 小心加上xx 毫升 固着液（Reagent B）
- 室温下，孵育 3 小时，避免干化
- 小心移去 固着液（Reagent B）
- 小心加上xx 毫升 清理液（Reagent A）
- 小心移去 清理液（Reagent A） 10．小心加上xx 毫升 离析液（Reagent C） 11．室温下孵育 5 分钟
- 小心移去 离析液（Reagent C）
- 小心加上xx 毫升 清理液（Reagent A）
- 小心移去 清理液（Reagent A）
14、小心加入xx 微升含有 预备液（Reagent D）和 染色液（Reagent E）的
染色工作液
15、放进 37℃培养箱里孵育 20 分钟16、取出载玻片，移去染色液
17、小心加上xx 毫升 清理液（Reagent A）
19、盖上盖玻片，用拇指小心且垂直加压
20、即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长 579nm，散发波长 599nm（线粒体呈现红色）
注意事项
- 本产品为 20 次操作
- 操作时，须戴手套
- 固着液（Reagent B）和 离析液（Reagent C）具有腐蚀性，注意操作安全
- 孵育时，必须避免光照
- 建议染色完成后，即刻进行荧光检测分析
- 剩余的染色工作液可放进－20℃储存备用
- 本产品适合活体染色和固定染色，染色剂不易洗掉，染色持久
- 根据不同组织类型，调整 染色工作液的使用剂量（1：100 至 1：1000 容量比），避免过度染色
- 本公司提供系列线粒体分析试剂产品
质量标准
- 本产品经鉴定性能稳定
- 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
上海羽哚生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后， 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告） 与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
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文献和实验Cell Death Differ：中大五院黄曦团队发现新冠病毒引起肺损伤的分子机制
caspase (CASP) 3 活性情况，免疫荧光染色观察过细胞核形态特征，活细胞成像动态观察过表达 M 蛋白细胞形态变化，证实 SARS-CoV-2 M 蛋白会诱导细胞凋亡（图 1）。 图片来源：Cell death & differentiation Caspase 活性检测和 JC-1 染色实验证实，过表达 M 蛋白会导致 H292 细胞线粒体电势下降，激活 caspase 9 相关的线粒体凋亡途径（图 3）。 图片来源：Cell death & differentiation 免疫
、内质网、高尔基体关系密切，为了区别，常用到一些示踪蛋白在荧光显微镜下来共定位： Lamp-2：溶酶体膜蛋白，可用于监测自噬体与溶酶体融合。 LysoTrackerTM 探针：有红或蓝色可选，显示所有酸性液泡。 pDsRed2-mito：载体，转染后表达一个融合蛋白（红色荧光蛋白+线粒体基质定位信号），可用来检测线粒体被自噬掉的程度（Mitophagy）。 MitoTraker探针：特异性显示活的线粒体，荧光在经过固定后还能保留。 Hsp60：定位
转移酶在冰上混合后加入。 j. 4度孵育过夜后放37度30min k. PBS清洗终止反应，荧光显微镜观察。 可是还是连阳性对照都没有信号。 请问，哪位做过，指点一下吧，谢谢。 或者发到我的邮箱：weiwangsky@hotmail.com dnazyme 首先，我不是高人没有搞过凋亡研究。 不过，我提醒你一句，商业化的凋亡试剂盒一般都是针对特定阶段。例如，针对细胞膜变化、Caspase酶活性、针对线粒体状态
