- ￥3870
- Sino Biological
- 北京
- 12081-H07B
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Human PAH / PH Protein (415 Asn/Asp, His Tag)
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
50 µg
蛋白名称：Human PAH / PH Protein (415 Asn/Asp, His Tag)
蛋白构建：A DNA sequence encoding the human PAH (P00439) (Met 1-Lys 452) (415 Asn/Asp) was expressed, with a polyhistidine tag at the N-terminus.
表达宿主：Baculovirus-Insect Cells
蛋白纯度：> 70 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性：0
蛋白内毒素：< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端：Met
蛋白分子量：The recombinant human PAH consists of 471 amino acids and predicts a molecular mass of 54 kDa. It migrates as an approximately 50 KDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号：P00439
蛋白氨基酸序列：Met1-Lys452,415Asn/Asp
蛋白标签：N-His
蛋白保存条件：Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验His 标签蛋白纯化效果不理想，宝宝心里苦呀。今天，小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的His标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面： 1、His标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高，容易导致蛋白炭化；功率过低，蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率，同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素，如：金属离子螯合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时，优化缓冲液的pH、盐
行 HIS 标签的捕获。 2、HIS标签蛋白结合了，但是洗脱不充分 原因一 洗脱条件太温和。 建议 增加咪唑的浓度或选择咪唑线性梯度洗脱，或者通过降低 pH 寻找最佳洗脱条件。需要注意的是，pH 低于 3.5 容易导致镍离子脱落。 原因二 蛋白柱上沉淀。 建议 1 降低蛋白浓度。可以减少上样量，或者采用咪唑线性而非步级梯度洗脱，增加蛋白稀释度。 建议 2 试用去污剂或者改变 NaCl 的浓度，或者使用变性剂 (4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素） 在变性条件下洗脱。 原因三 非特异性的疏水或者其他相互
Purification of 6xHis epitope tagged proteins by Ni-NTA-Agarose His标签蛋白纯化
Low (“Low”)Imidazole Buffer 0.5L 100mM Imidizole 3.4g 5% glycerol 25ml 100% glycerol 50mM Tris-HCl (pH 7.9)50ml 0.5M Tris-HCl (pH 7.9) 0.1% Tween-20 0.5M 100% Tween-20 500mM NaCl50ml 5M NaCl dH2O Fill to 0.5L (start w/ 350ml) High (“High
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