EMSA突变探针-OCT-1

电泳迁移实验(EMSA)方法

。 5. 电泳分析：EMSA的典型分析结果可以参见下面的图1。 图1. 一个典型的EMSA/Gel-Shift分析图 1，阴性对照反应（标记探针）；2，常规反应（含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针）；3，探针冷竞争反应（含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针）；4，突变探针的冷竞争反应（含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针）；5，Super-shift反应（含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异

非放射EMSA实验技术讨论

EMSA是一个比较复杂的试验技术,由于工作原因接触这个试验技术到现在也有三年多的时间了,做了大概也有几百次吧, 那倒理想的试验结果的同时也碰到了很多莫名的问题和结果,到现在为止还有没有解决的,找不到原因的一个问题,呵呵! 现和smalldonkey商量一下将我对这个实验技术的总结和一个心得写出来给大家分享,批评指正。EMSA实验技术作为一个经典的DNA/protein,RNA/protein的检测技术,不是很多简单的实验技术可以替代的! 比如曾经在我们这个论坛中有站友提到

【求助】核蛋白提取效果~

qingyu2010 打算挑战一下传说中的EMSA所以需要学习提取核蛋白了~不过因为还是菜鸟所以有个小问题。。。 我想先做western检验一下核蛋白和胞质蛋白分离的好不好，该选择什么蛋白来检测呢？当然最好能是常用的或者以后也用的上抗体的蛋白啦~ 对于核蛋白，是不是用histone或者laminin或者大多数转录因子都可以？Thermo的网页上给的是OCT-1，某文献里是SP-1，我用c-Jun之类的OK么?_? 对于胞质