Annexin V-Alexa Fluor488/PI 凋亡

Annexin V-Alexa Fluor488/PI 凋亡检测试剂盒产品描述

Annexin V-Alexa Fluor488/PI细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor488标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor488 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

Annexin V-Alexa Fluor488/PI 凋亡检测试剂盒产品组分

组分

产品编号/规格

40305ES20（20T）

40305ES50（50T）

40305ES60（100T）

Annexin V-Alexa Fluor488

100 μl

250 μl

500 μl

PI Staining Solution (20 μg/ml)

200 μl

500 μl

1.0 ml

4×Binding Buffer

4 ml

10 ml

20 ml

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。本试剂盒中所有组分均在4℃保存，Annexin V-Alexa Fluor488、PI需避光保存。

Annexin V-Alexa Fluor488/PI 凋亡检测试剂盒使用说明

1.1 样品染色

1.a) 悬浮细胞：300g，4℃离心5 min收集细胞。

b) 贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化后，300g，4℃离心5 min收集细胞。胰酶消化时间不宜过长，以防引起假阳性。

2.配制1×Binding Buffer：用去离子水按1:4 稀释4×Binding Buffer（4ml 结合缓冲液+12ml 去离子水）。

3.用4℃预冷的PBS洗涤细胞2次，每次均需300g，4℃离心5 min。

4.加入250 μl 1×Binding Buffer重悬细胞，调节其浓度为1×106/ml。

5.取100 μl细胞悬液于5ml流式管中，加入5μl Annexin V-Alexa Fluor 488和10 μl PI，轻轻混匀。

6.避光、室温反应15 min。

7.加入400 μl PBS，混匀，样品在1小时内用流式细胞仪检测。

注意：为了避免洗涤细胞时损失细胞，在吸液时可以用大的Tip头套上小的Tip头吸液。
Annexin V-Alexa Fluor488/PI 凋亡检测试剂盒
xy1383 TEpiCM 扁桃体上皮细胞培养基 Tonsil Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1384 OKM 口腔角质细胞培养基 Oral Keratinocyte Medium 500 ml ATCC
xy1385 CoEpiCM 结肠上皮细胞培养基 Colonic Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1386 BEpiCM 支气管上皮细胞培养基 Bronchial Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1387 SAEpiCM 气管上皮细胞培养基 Small Airway Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1388 EpiCM-2 上皮细胞培养基-2 Epithelial Cell Medium-2 500 ml ATCC
xy1389 UCM 尿道上皮细胞培养基 Urothelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1390 PEpiCM 前列腺上皮细胞培养基 Prostate Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1391 STEMium 人胚胎干细胞无血清培养基 Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium 500 ml ATCC
xy1392 STEMium-XF 无异种人胚胎干细胞生长培养基 Xeno-free Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium 500 ml ATCC
xy1393 MEF-cm 小鼠胚胎成纤维细胞培养基 Mouse Embryonic Fibroblasts-Conditioned Medium 100 ml ATCC
xy1394 bFGF-std MEF-cm 碱性成纤维细胞生长因子刺激的小鼠胚胎成纤维细胞条件培养基 bFGF-Stimulated Mouse Embryonic Fibroblasts Conditioned Medium 100ml ATCC
xy1395 CEpiCM 角膜上皮细胞培养基 Corneal Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1396 OEpiCM 卵巢上皮细胞培养基 Ovarian Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1397 MSCM-sf 间充质干细胞培养基 Mesenchymal Stem Cell Medium-serum free 500 ml ATCC
xy1398 MEpiCM 乳腺上皮细胞培养基 Mammary Epithelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1399 ATCC
xy1400 ATCC
xy1401 KM-acf 角质细胞培养基 Keratinocyte Medium-animal component free 500 ml ATCC
xy1402 FM-acf 成纤维细胞培养基 Fibroblast Medium-animal component free 500 ml ATCC
xy1403 STEMium-ACF 人类多能干细胞培养基-无动物组分 STEMium. Human Pluripotent Stem Cell Growth Medium-animal component free 500ml ATCC
xy1404 MSCM-acf 间充质干细胞培养基 Mesenchymal Stem Cell Medium-animal component free 500 ml ATCC
xy1405 ATCC
xy1406 ATCC
xy1407 MEM MEM MEM with Earle's Salts and L-Glutamine 500 ml ATCC
xy1408 MEM MEM MEM with Hank's Salts and L-Glutamine 500 ml ATCC
xy1409 MEM MEM MEM with Eagles's Salts and Glutamine 500 ml ATCC
xy1410 M199E M199E Medium 199 with Earle's Salts and L-Glutamine 500 ml ATCC
xy1411 M199H M199H Medium 199 with Hanks Salts and L-Glutamine 500 ml ATCC
xy1412 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine and Sodium Pyruvate 500 ml ATCC
xy1413 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate 500 ml ATCC
xy1414 DMEM DMEM DMEM with High-Glucose - L-Glutamine and Sodium Pyruvate 1L ATCC
xy1415 DMEM DMEM DMEM with L-Glutamine - Sodium Pyruvate and 25 mM HEPES 500 ml ATCC