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GST pulldown
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广州伯信生物科技有限公司
① 互作蛋白质名称、Gene ID、物种信息;
② 诱饵蛋白质及捕获蛋白质表达载体;
③ 一抗;
伯信提供
① PAGE电泳电子图片;
② western blot原始图片及鉴定结果;
① 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论)。
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文献和实验做一个定量。 纯化GST融合蛋白时,有些容易降解的蛋白质会出现电泳时有类似GST分子量的降解条带出现。 山明水秀lxm 请问GST pulldown的柱子从哪里买到的,具体叫什么柱子呢,谢谢 xiaohuilang 上样量太大造成的 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。 实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。 试剂:NaCl, KCl,Na2HPO4,KH2PO4,Triton-100,IPTG(Merck
一、GST pull-down 基本知识1. GST pull-down 概念GST pull-down:是利用重组技术将探针蛋白与 GST 谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过 GST 与固相化在球珠上的 GSH 谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。2. GST pull-down 研究对象二、GST pull-down 原理1. GST pull-down 结合原理2. GST pull-down 分离原理三、GST pull-down 流程1. 蛋白的抽提与纯化:①
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