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- 武汉
- 酵母单/双杂交-文库构建/文库筛选， 金开瑞拥有较齐全的cDNA文库，通过将已知基因作为诱饵，从选定的文库中筛选出与诱饵蛋白/诱饵序列存在特异相互作用的蛋白，材料用量少，获得全长的比例高。
- 2026年01月13日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
酵母单/双杂交-文库构建/文库筛选
- 提供商：
武汉金开瑞生物工程有限公司
- 规格：
视具体情况而定，详情请咨询
金开瑞拥有较齐全的cDNA文库，通过将已知基因作为诱饵，从选定的文库中筛选出与诱饵蛋白/诱饵序列存在特异相互作用的蛋白，材料用量少，获得全长的比例高。
技术应用
酵母双杂交系统因其具有灵敏性高，功能强大，适应范围广等特点，现已被广泛应用于多个研究领域。
1、将已知基因作为诱饵，在选定的cDNA文库中筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白；
2、一对已知蛋白相互作用研究；
3、蛋白相互作用结构域和位点的研究；
4、建立基因组蛋白连锁图。
5、酵母单杂交技术是Li在酵母双杂交的基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具，被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控，如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。
服务优势
采用Clontech SMART专利技术，以总RNA为模板，用SMART方法反转录成cDNA，材料用量少，获得全长的比例高。
接收订单及样品——总RNA提取——mRNA纯化——反转录——双链cDNA合成及纯化——共转至酵母感受态细胞（改造的Y1H)——转化效率测定——文库效价测定——结果交付
2、酵母单杂交文库筛选
接收订单及样品——诱饵载体及诱饵菌株构建——自激活检测——克隆数计算——阳性克隆菌株鉴定——结果交付
3、酵母双杂交文库筛选
接收订单及样品——诱饵载体的构建——毒性检测——测定杂交效率——阳性克隆菌株鉴定——结果交付
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服务项目
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客户提供
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最终交付
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文库构建
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组织/细胞
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滴度在1×108以上的酵母文库菌液；文库PCR鉴定结果图片（阳性率在80%左右）
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文库筛选
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promoter基因序列/质粒
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筛选过程中的全部原始图片；筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果
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针对酵母单杂交实验结果，可作进一步验证：
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服务内容
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实验目的
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细分
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周期（工作日）
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EMSA
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验证启动子和蛋白互做
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探针合成及标记
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10
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EMSA实验
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20
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双萤光素酶检测
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验证启动子和蛋白互做
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载体构建
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10-15
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双萤光素酶检测
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25
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注：1. 双萤光素酶检测默认使用293T细胞，使用其他细胞视培养及转染难度议价；
2. 双萤光素酶检测启动子-转录因子验证默认1个转录因子 + 启动子序列WT和Mut各1个；microRNA靶基因验证默认1个microRNA + 靶序列WT和Mut各1个，超过以上组合数量请询价。
酵母双杂交
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服务项目
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客户提供
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最终交付
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文库构建
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组织/细胞
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滴度在1×108以上的酵母文库菌液；文库PCR鉴定结果图片（阳性率在90%左右）
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文库筛选
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蛋白序列/基因序列/质粒
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筛选过程中的全部原始图片；筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果
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针对酵母双杂交实验结果，可作进一步验证：
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服务内容
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实验目的
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细分
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周期（工作日）
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Co-IP
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验证蛋白互做
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/
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20
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GST pull-down
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验证蛋白互做
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GST pull-down+WB/银染
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20
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金开瑞-功能蛋白质组学一站式服务商：
武汉金开瑞生物工程有限公司位于武汉国家生物产业基地，是一家专业致力于为全球制药企业、诊断试剂企业、科研试剂研发企业、高校和科研院所以及大型医院提供蛋白及相关研究技术服务的高新技术企业。六大核心技术平台、专业技术团队，保证您的项目按时保质的实施。
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文献和实验Construction and characterization of a high-quality cDNA library of Cymbidium faberi suitable for yeast one- and twohybrid assays
与胞浆突变的哺乳动物Ras融合（诱饵），将蛋白质Y与膜定位信号如豆蔻酰基化序列相融合（猎物），如果X与Y结合，则突变Ras被定位于膜上而发挥作用，使酵母菌株cdc25-2得以在36℃生长[20]。（六）酵母双杂交系统的拓展国外学者为了拓宽传统的酵母双杂交的应用范围，在完善该系统的同时，创立了许多基于双杂交原理的新系统。目前应用较为成功的主要有：单杂交系统(One-hybrid system)、三杂交系统(Three-hybrid system)和逆向双杂交系统(Reverse two hybrid
1) 用含Bait 基因的质粒作为阳性对照，用宿主菌Y190 作为阴性对照 2) 按照下列反应体系进行PCR ExTaq Premix(Takara) 10μl (2X ) 5’Primer 0.5μl (10μM) 3’Primer 0.5μl (10μM) 第二章 酵母双杂交筛选 9 ddH20 8.9μl 菌 0.1μl 3)按照下列反应条件进行PCR 95℃ 5 分钟 94℃ 30 秒 58℃ 30 秒 72℃ 2 分钟 72℃ 5 分钟
的功能蛋白编码基因，验证反式转录调控因子的DNA结合结构域，准确定位参与特定蛋白质结合的核苷酸序列。 酵母单杂交用的cDNA文库用什么试剂盒构建? 单杂交文库可以用酵母双杂交试剂盒中的SMART试剂盒来构建 用BD公司的酵母单杂交文库构建和筛选试剂盒进行酵母单杂交文库的构建。具体操作步骤为：在15 mL试管中依次加入如下成分：20 μL SMART cDNA、6 μL pGADT7-Rec2(0.5 μg/μL，SmaI-线性化)、5 μg pHIS2-PBE
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