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酵母双杂交技术
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广州伯信生物科技有限公司
将编码DNA结合功能域的基因与已知诱饵蛋白质基因构建在同一个表达载体上,将编码DNA转录激活域的基因和与已知捕获蛋白质基因构建在同一个表达载体上,同时将上述两种载体转化改造后的酵母。当两种载体所表达的融合蛋白质能够相互作用时,功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因,从而通过功能互补和显色反应确定蛋白质间的互作关系。
客户提供
① 目标蛋白质名称、物种信息、基因 ID(验证性);
② 诱饵蛋白质名称、物种信息、基因 ID、组织或细胞(探究性);
伯信提供
① 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论);
② 文库(探究性)。
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文献和实验相关专题蛋白质组蛋白质组(proteome)一词是澳大利亚科学家Williams和Wilkins于1994年首先提出的,它是指一个细胞或一个组织基因组所表达的全部蛋白质总和,是对应于一个基因组的所有蛋白质构成的整体。短短20年间,蛋白质组的研究取得了惊人的进展,这相当程度上要归功于质谱技术在蛋白质组中的应用和不断发展。同时,蛋白质组和基因组的发展是相辅相成的,凡是经过基因组测序的物种,都可以用质谱技术大规模鉴定其蛋白质组成。当前,比较主流的蛋白质组学研究方案当属LC-MS/MS系统, LC
A Guide to Yeast Two-Hybrid Experiments(酵母双杂交实验指南)
Russell L. Finley, Jr.1,* 1Center for Molecular Medicine and Genetics and Department of Biochemistry and Molecular Biology, Wayne State University School of Medicine, Detroit, MI 48201, USA
1.如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的,该怎么办? 在某些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1 ml的SD/–Trp,接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板,在30 ℃下温浴,直至平板上的克隆相互粘在一起。用5 ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆,并收集到一管中,这样就可以使用这个细胞重悬液进行正常的杂交反应。 2.如果诱饵蛋白能直接激活报告
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