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联硕生物
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9001-37-0
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1瓶
一般描述
分子量:160 kDa(凝胶过滤)
pI: 1865
消光系数:E1% = 16.7 (280 nm)
葡萄糖氧化酶是由 2 个相等的亚基组成的二聚体,每个亚基的分子量为 80kDa。每个亚基含有一个黄素腺嘌呤二核苷酸部分和一个铁。该酶是含有 ~16% 中性糖和 2% 氨基糖的糖蛋白。该酶还含有 3 个半胱氨酸残基和 8 个 N-连接糖基化的潜在位点。
葡萄糖氧化酶能够以不同的速率氧化 D-己醛糖、单脱氧-D-葡萄糖和甲基-D-葡萄糖。
葡萄糖氧化酶的最佳 pH 为 5.5,虽然它的活性范围很宽,pH 4-7葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖具有特异性,KM为33-110mM。
葡萄糖氧化酶不需要任何活化剂,但它被Ag+、Hg2+、Cu2+、醋酸苯汞和对-氯甲基苯甲酸酯抑制。
葡萄糖氧化酶可用于酶法测定溶液中的 D-葡萄糖。由于葡萄糖氧化酶将β-D-葡萄糖氧化成D-葡糖酸内酯和过氧化氢,因此辣根过氧化物酶通常用作葡萄糖测定的偶联酶。尽管葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖具有特异性,但是可以对D-葡萄糖溶液进行定量,因为当酶促反应消耗β-D-葡萄糖时,α-D-glucose葡萄糖将变为β-D-葡萄糖。
应用
葡萄糖氧化酶广泛用于食品和制药工业,以及葡萄糖生物传感器的主要组分。
生化/生理作用
葡萄糖氧化酶催化β-d-葡萄糖氧化成 d-葡糖酸-β-内酯和过氧化氢,分子氧作为电子受体。
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文献和实验从特异青霉(Penicillium notatum)等霉菌和蜂蜜中发现的酶。它能催化 D-葡萄糖 O2 D-葡糖酸(的δ -内酯) H2 O2 的反应。 EC1. 1. 3. 4.特异青霉( P. notatum)的酶以其显有抗菌性而引入注意。因此,也有葡糖氧化酶( notatin)的称呼,现已清楚,抗菌性是由于反应生成的 H2 O2 具灭菌作用。提纯物含有 2分子的 FAD,作为电子受体,除 O2 外,也能与 2, 6,二氯酚、靛酚反应。该酶对葡萄糖具有特异性。米氏
【目的和要求】 学习和掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的方法。 【实验原理】 方法参阅Trinder. P. Ann. Clin. Biochem.,1969, 6:24-27。 醌亚胺在480-550nm范围内有最大光吸收峰,且醌亚胺的量与葡萄糖的量成正比,利用比色法测定醌亚胺的量,即可计算出血糖的含量。
1.0mL 混匀,置37℃水浴保温15分钟,用分光光度计505nm比色,以空白管调零点,分别读出各管吸光度。 如果使用自动生化分析仪测定,可根据 仪器 的程序要求进行编制。 计算: 血糖mmol/L = (测定管吸光度/标准管吸光度) ×5.55 或血糖mg/dl = (测定管吸光度/标准管吸光度) ×100 如血糖高于22mmol/L时,将 血清 (浆)稀释后再进行
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