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文献和实验。 Percoll浓度(%) 70 60 50 40 30 20 比重g/ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031 2. 不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的Percoll液
试剂 1. 小牛血清 2. Percoll细胞分离液 3. 8.5%NaCl 4. 1.5MPBS 实验设备 1. 高速冷冻离心机(3K-30) 2. 4℃、-20℃冰箱 3. 长针头注射器 4. 1.5mL和10mL离心管 实验材料 PBMC细胞 实验步骤 1. 不同
(1)Percoll:将购买的Percoll(Pharmacia)用10×HBSS(无钙、镁)按9:1的体积比配成储备液,该浓度被认为100%。再用1×HBSS(含10mmol/L HEPES,pH7.2)将100%的Percoll稀释成81%、70%、55%的浓度备用,其密度分别为1.100、1.0875和1.0697。 (2)葡聚糖:将Dextran T-500 用PBS配成4%的浓度。 (3)离心梯度的配制:取将5ml 81%的Percoll加入17×100mm的离心管底,然后依次加入3ml 70
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