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联硕生物
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9001-37-0
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1瓶
一般描述
分子量:160 kDa(凝胶过滤)
pI: 1865
消光系数:E1% = 16.7 (280 nm)
来自黑曲 霉的葡萄糖氧化酶是由 2 个相等的亚基组成的二聚体,每个亚基的分子量为 80kDa。每个亚基含有一个黄素腺嘌呤二核苷酸部分和一个铁。该酶是含有 ~16% 中性糖和 2% 氨基糖的糖蛋白。该酶还含有 3 个半胱氨酸残基和 8 个 N-连接糖基化的潜在位点。
葡萄糖氧化酶能够以不同的速率氧化 D-己醛糖、单脱氧-D-葡萄糖和甲基-D-葡萄糖。
葡萄糖氧化酶的最佳 pH 为 5.5,虽然它的活性范围很宽,pH 4-7葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖具有特异性,KM为33-110mM。
葡萄糖氧化酶不需要任何活化剂,但它被Ag+、Hg2+、Cu2+、醋酸苯汞和对-氯甲基苯甲酸酯抑制。它不受非金属 SH 试剂的抑制:N-乙基马来酰亚胺、碘乙 酸盐和碘乙 酰胺。
葡萄糖氧化酶可用于酶法测定溶液中的 D-葡萄糖。由于葡萄糖氧化酶将β-D-葡萄糖氧化成D-葡糖酸内酯和过氧化氢,因此辣根过氧化物酶通常用作葡萄糖测定的偶联酶。尽管葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖具有特异性,但是可以对D-葡萄糖溶液进行定量,因为当酶促反应消耗β-D-葡萄糖时,α-D-glucose葡萄糖将变为β-D-葡萄糖。
应用
一些论文中引用了G2133葡萄糖氧化酶在其实验方案和各种应用中的用途,例如:
a) 生物传感器开发:
海藻酸盐微球上的重氮树脂纳米膜涂层: Srivastava, R. et al., Biotechnol.Bioeng., 91(1), 124-131 (2005).
纸基葡萄糖生物传感器: Lankelma, J. et al., Anal.Chem., 84(9), 417-4152 (2012)
带有水凝胶固定化葡萄糖氧化酶的血液葡萄糖分析用微流体装置:He, R.-Y. et al., RSC Adv., 9, 32367-32374 (2019).
b) 人RAD51细丝生成的单分子FRET研究: Subramanyam, S. et al., Methods Enzymol., 600, 201-232 (2018)。
c) 带有壳聚糖膜的酶燃料电池: Bahar, T., and Yazici, M.S., Electroanalysis, 32(6), 1304-1314 (2020).
葡萄糖氧化酶广泛用于食品和制药工业,以及葡萄糖生物传感器的主要组分。
生化/生理作用
葡萄糖氧化酶催化β-d-葡萄糖氧化成 d-葡糖酸-β-内酯和过氧化氢,分子氧作为电子受体。
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文献和实验常数 Km也低( 10-3 M程度),由于能定量地生成 H2 O2 ,因此作为 D-葡萄糖的定量试剂而广泛被应用于生物化学领域和临床检查。
比色杯 光径:1cm1.将10mlR1与90mlR2混合均匀,既为工作液。桉下表操作: 2.分别混合均匀,37℃保温10~15分钟(避免太阳光直射),以空白管调零,分别读取A标准及A样品。 【注意事项】 1.样品中的葡萄糖浓度超过22.2mmol/L(400mg/dl),可将样品量减半,改为5ul,标准量不变,重测,结果乘以2。2.试剂R1为液体酶,注意防冻
管 测定管 血浆(血清) — — 10μL 葡萄糖标准液(5.55mmol/L) — 10μL
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