葡萄糖氧化酶法测定血糖含量
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【目的和要求】
学习和掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的方法。
【实验原理】
方法参阅Trinder. P. Ann. Clin. Biochem.,1969, 6:24-27。
醌亚胺在480-550nm范围内有最大光吸收峰,且醌亚胺的量与葡萄糖的量成正比,利用比色法测定醌亚胺的量,即可计算出血糖的含量。
【实验 试剂 和器材】
(一)
试剂
试剂稳定性:原装试剂在2~8℃避光保存,有效期15个月。混合后2~8℃可稳定1个月,室温可稳定3天。
实验样品:新鲜无溶血血清。
(二)器材:
试管
及
试管
架,吸量管,移液枪,恒温
水浴
,722型
分光光度计
。
【实验方法】
波长:505nm(480~550nm)温度:37℃; 比色杯 光径:1cm
1.将10mlR1与90mlR2混合均匀,既为工作液。桉下表操作:
2.分别混合均匀,37℃保温10~15分钟(避免太阳光直射),以空白管调零,分别读取A标准及A样品。
【注意事项】
1.样品中的葡萄糖浓度超过22.2mmol/L(400mg/dl),可将样品量减半,改为5ul,标准量不变,重测,结果乘以2。
2.试剂R1为液体酶,注意防冻