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Bst DNA 聚合酶，全长

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    概述
    Bst DNA 聚合酶大片段是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的一部分，具有 5' →3' DNA 聚合酶活性，但不具有 5' →3' 外切核酸酶活性。
    来源
    携带有 Bacillus stearothermophilus （H. Kong）基因的 E. coli 菌株。
    反应缓冲液
    1X ThermoPol 反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl（pH 8.8 @ 25 ℃），10 mM KCl，10 mM (NH4)2SO4 ，2mM MgSO4，0.1% Triton X-100]。
    单位定义
    1 单位指 65 ℃ 条件下，30 分钟内使 10nmol 的 dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
    活性检测条件
    50 mM KCl，20 mM Tris-HCl（pH8.8），10 mM MgCl2 ，30 nM M13mp18 ssDNA，70 nM M13 测序引物（-47）24 mer，200 μM dATP，200 μMdCTP，200 μM dGTP，100 μM [3 H]-dTTP，100 μg/ml BSA 和酶。65 ℃ 温育。
    浓度
    5,000 units/ml。
    贮存条件
    50 mM KCl，10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM DTT，0.1 mM EDTA，0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。贮存于 -20 ℃。
    热失活
    80 ℃ 20 分钟。
    注意事项
    Bst DNA 聚合酶不具有 3' →5' 外切酶活性。
    建议反应温度不要超过 70 ℃。
    Bst DNA 聚合酶不能用于热循环测序或 PCR。
    参考文献
    (1) Mead, D.A. et al. (1991) BioTechniques, 11, 76–87.
    (2) Aliotta, J.M. et al. (1996) Genetic Analysis, 12,185–195.

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