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dNTP 混合液

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    概述
    dNTP 套装：
    四种独立包装的超纯脱氧核苷三磷酸的溶液（ dATP ， dCTP ， dGTP 和 dTTP ）。每种的浓度为 100 mM 。

     

    dNTP 混合液：
    含相同摩尔数的超纯 dATP ， dCTP ， dGTP 和 dTTP 。每种的浓度为 10 mM 。

     

    rNTP 混合液：
    含相同摩尔数的四种核苷三磷酸： rATP ， rCTP ， rGTP 和 rUTP 。每种浓度为 80 mM （ rNTP 总浓度相当于 320 mM ）。

     

    7- 去氮 -dGTP ：
    含有 5 mM 7- 去氮 - dGTP 的二锂盐溶液。 2' - 脱氧 -5- 甲基 5' - 三磷酸胞苷（ dm5CTP ）： 10 mM 溶液， pH 7.0 。

     

     
    acyNTP 套装：
    四种独立包装的 acyNTP （ acyATP ， acyCTP ， acyGTP 和 acyTTP ）。以干粉形式提供，加入 50 μl 蒸馏水或去离子水（ Milli-QTM ）后， acyNTP 的终浓度为 10 mM 。

     

    acyNTP 可作为链终止基团，因而对那些一般采用 ddNTP 的实验有用，如 DNA 测序（ 1 ， 2 ）和 SNP 分析（ 3 ）。 acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应，特别是 TherminatorTM DNA 聚合酶。 TherminatorDNA 聚合酶经过基因工程改造后，拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力，这些类似物的糖环发生了改变，如 rNTP ， ddNTP ， 2' 脱氧核苷酸，特别是 acy 碱基类似物（ 4 ， 5 ）。
    参考文献
    (1) Sanger, F., Nicklen, S. and Coulson, A.R. (1977)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 74, 5463–5467.
    (2) Trainor, G.L. (1996) U.S. Patent #5, 558,991.
    (3) Haff, L.A. and Simirnov, I.P. (1997) Genome Methods7, 378–388.
    (4) Gardner , A.F. and Jack, W.E. (1999) Nucleic Acids Res. 27, 2545–2553.
    (5) Gardner , A.F. and Jack, W.E. (2002) Nucleic Acids Res. In press.

     

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    • 不同浓度竟争模板和控制混合液的配制

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