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- 2025年07月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
RT-qPCR
- 提供商：
然科生物
- 规格：
1
一：简介
实时荧光定量PCR技术（Real-time quantitative PCR），是指在PCR反应体系中加入荧光基因，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具，目前已得到广泛应用（如转基因动植物检测、RNAi基因失活率检测、病原微生物或病毒含量检测、基因差异表达、基因分型）。
二：服务介绍
服务内容
（1）根据目的基因设计引物及引物合成
（2）RNA抽提+逆转录
（3）RNA定量及质量分析
（4）使用荧光染料SYBR Green法进行实时定量PCR（重复三次）
（5）数据处理
客户提供
（1）基因信息
（2）尽可能新鲜和足够量的组织（≧100mg）、细胞样品（106）或血清，或直接提供纯化好的总RAN（≧1ug）
我们提供
（1）荧光定量PCR检测原始数据
（2）扩增曲线及溶解曲线
（3）结果分析
质量保证
我们保证所提供的实验结果客观真实。
扫一扫，学些实验技术
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文献和实验通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA靶向物mRNAs的相对定量分析
谷氨酰胺，1%的盘尼西林/链霉素，10%的FBS，在+37℃ 5%CO2条件下培养HeLa细胞。用miRNA 21 miRIDIAN类似物，miRNA 类似物miRIDIAN对照，miRNA 21 mi RIDIAN抑制剂和miRNA miRIDIAN抑制剂对照siRNA（dhar-macon都为50nM），以及X-tremeGENE siRNA转染试剂（罗氏公司），按照生产商的方案进行转染。 RNA提取与逆转录 在转染之后两天，使用High Pure RNA Isolation Kit（罗氏
活动中发挥着重要的作用。随着近些年来 lncRNA 相关论文发表量的成倍增加，该领域关注度也日益增高，已成为继信使 RNA（mRNA）、小 RNA（microRNA、siRNA 等）之后功能基因组学最火热的研究领域。LncRNA 的经典研究思路如下：现在很多人拿到测序结果或者芯片结果之后，无从下手。具体可以从以下几个步骤着手：第一步 确定差异lncRNA表达利用 RT-PCR 或者 RT-qPCR 检测 lncRNA 在不同细胞或者组织中的表达水平。 第二步 探究 lncRNA 特点（1）通过 QD
了来自结肠直肠癌（CRC）患者和健康人血清外泌体中的 miRNA 表达有明显的差异。 作者先通过外泌体 miRNA 测序（4 个 CRC 患者和 2 个健康人）观察外泌体的 miRNA 差异表达，选取了 29 个下调 miRNAs 和 9 个上调 miRNAs 作为候选标志物。 再使用 RT-qPCR（165 个 CRC 患者和 153 个健康人）进一步验证，最后发现与健康人相比，早期 CRC 患者外泌体 miR-99b-5p 和 miR-150-5p 的表达水平显著降低，术后外泌体 miR-99b-5
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