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武汉傲星生物科技有限公司
- 服务名称:
检测类
- 规格:
样本
荧光定量PCR,real-time PCR,简称qPCR, 1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
取材要求:
普通PCR及real time PCR样本
| 样本形式 | 处理方式 | 保存 | 运输 | 可检测指标数 |
| 新鲜组织 |
|
液氮或-80℃ | 干冰 | 3-5 |
| 细胞 |
|
液氮或-80℃ | 干冰 | 2-3 |
| 全血 | 1、大于等于2ml全血加入EDTA或肝素抗凝。 | 4℃ | 冰袋 | 3-5 |
| 2、4h内进行淋巴细胞分离 | 液氮或-80℃ | 干冰 | 询问 | |
| 体液 |
|
液氮或-80℃ | 干冰 | 询问 |
- 组织在1-2min内完成取材,速冻,,并立即放入-80℃或液氮中保存。
- 使用的冻存管最好也用DEPC处理。
- 对于组织及细胞样本,如果没有液氮或-80℃冰箱,也可用RNAlater保存,但是组织一定要切成比较小的块状,-20℃保存运输。
结果形式:我们提供实验报告、EXCEL表格数据、溶解曲线图、扩增曲线图
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文献和实验实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个PCR过程。(2)SYBR荧光染料法:该方法
miRNA实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR从1996年美国Applied Biosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个
实时定量PCR也被称为实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR),是一种在DNA扩增反应中加入荧光基团,以荧光信号积累实时监测每次PCR循环后产物总量,进而对待测样品中的目的序列进行定量分析的方法。 基本原理 在学习实时定量PCR数据处理之前,我们首先需要了解一下它的数学原理,Ct值为什么是我们数据处理过程中的一个关键的因素。这两个图显示的是实时定量PCR的一组结果。上图是原始的线性图谱,下图则是处理过的指数图谱,但是它们两者表示的是同样
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