Accutase酶细胞分离培养基

原代细胞分离和培养基本步骤

原代细胞分离和培养基本步骤1、器官和组织的选择尽可能的去除不必要的组织和血迹。2、原代细胞的分离（1）应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。（2）根据组织来源不同，可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。3、原代细胞的培养：（1）PriCells原代细胞特制培养基（2）PriCells原代细胞特制添加物（3）优质胎牛血清4、细胞的培养和鉴定：PriCells原代细胞鉴定试剂盒5、原代细胞的传代、保存（1）传代：依椐细胞的生长状态，生长的细胞1：2或1：3进行传代

细胞培养基本技术（免疫细胞分离、肿瘤细胞株传代培养）

（张卓然、孟庆丽、陈琰、陈彦伟） 一、免疫细胞分离技术 1、淋巴细胞的分离 取肝素抗凝血1m1 加Hanks 液1m1 稀释后，沿管壁徐徐滴流叠加盛有2m1 淋巴细胞分离液的试管内(注意勿与分离液混合，然后2000r／min 水平离心20min，管内分为4 层，自上而下依次为血浆，单个核细胞，颗粒白细胞、红细胞。用毛细管伸至单个核细胞层中(位于细胞分离液与血浆的界面上)，沿管壁轻轻吸出全部细胞。然后用Hanks 液洗两次

类器官培养与应用——肝类器官

，5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基，将 iPSCs 接种于明胶上，添加 10ml iPSCs（I）培养基，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。   定向内胚层分化 4、在 60mm 培养皿中加入 2ml Matrigel，室温静置 2h 并添加 DMEM-F12 培养基至完全没过 Matrigel。 5、用不含 Ca2+/Mg2+ 的 PBS 冲洗 iPSCs 后，加入 300μl Accutase，37℃ 孵育