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        原代细胞分离和培养基本步骤

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        18667

        原代细胞分离和培养基本步骤

        1、器官和组织的选择

        尽可能的去除不必要的组织和血迹。

        2、原代细胞的分离
        (1)应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。

        (2)根据组织来源不同,可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。

        3、原代细胞的培养:
        (1)PriCells原代细胞特制培养基
        (2)PriCells原代细胞特制添加物

        (3)优质胎牛血清

        4、细胞的培养和鉴定:

        PriCells原代细胞鉴定试剂盒

        5、原代细胞的传代、保存
        (1)传代:依椐细胞的生长状态,生长的细胞1:2或1:3进行传代。
        (2)保存:DMSO+培养液+血清

        按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟)→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃ 过夜)→液氮。

        6、原代细胞的复苏
        (1)取出细胞,迅速放入37℃温水中快速解冻。
        (2)吸出细胞悬液,并加10倍以上培养液。
        (3)用培养液适当稀释后接种培养瓶,放入37℃ CO2 培养箱静置培养。

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