iTRAQ 定量蛋白质组

iTRAQ(isobaric tag for relative and absolute quantitation)定量蛋白质组是基于对肽段的NH2-进行标记，将来自不同样品的同一个肽段做上不同的标记，通过标记物质的含量来指示肽段的含量，并根据肽段含量推断出对应蛋白质的含量。该方法因其标记效率高、灵敏度高、定量准确以及一次可以标记至多8个样品等特点，是目前非常流行的定量蛋白质组方法，可以快速发现不同处理、不同突变体、不同环境条件影响的蛋白质组的差异，并且锁定差异蛋白质进行功能研究。
图：8标记iTRAQ定量蛋白质的流程。

iTRAQ技术服务优势：

• 灵敏度高，检测限低，可检测出低丰度蛋白；

• 分离能力强，分析范围广，可以对任何类型的蛋白质进行分离鉴定，包括高分子量蛋白质、酸性蛋白和碱性蛋白，膜蛋白和不溶性蛋白；
• 高通量：同时对8个样本进行分析，提高了实验通量，可同时对多个时间点或不同处理的蛋白质进行分析；
• 结果可靠：定性与定量分析结果更加可靠；
• 自动化程度高：液相与质谱联用，自动化操作，分析速度快，分离效果好。

我公司的技术特点：

• 高效率样品前处理：进行high pH RP-HPLC高效分离，自动化收集保证均一性。
• 高鉴定率：系统全面地研究组织或细胞中尽可能多的蛋白质，可鉴定多达6000种蛋白(以人HepG2为例)。
• 定量精确：每组平行比较可以做8个样本，单个样品标记效率可以达到98%，8标记同时做可减少样本处理和分批上质谱造成的实验误差。
• 质控严格：我们在蛋白提取、多肽酶解、iTRAQ标记等处设定严格的质控，保证实验操作没有问题。
• 仪器性能优良：AB SCIEX 5600-plus是基于高分辨率(~30000)、高质量精度(小于2ppm)质谱平台，可获得更加准确的结果。此外，该仪器无物种特异性限制，理论上可用于所有物种。

服务内容及实验流程：

• 样本制备与定量；
• 酶切、iTRAQ试剂标记；
• 除盐；
• 等量混合标记肽段；
• MS/MS质谱检测及分析；
• 相关生物信息分析；
• 实验报告提交

信息分析内容：

• 蛋白质鉴定、定量
• 蛋白质GO注释、Pathway代谢通路注释
• 差异蛋白GO、Pathway功能富集分析
• 技术重复性分析（仅针对有重复设计的项目）
• 多样品间表达模式聚类（适用于样本数≥3的项目）

实验报告内容：

• 蛋白质鉴定和定量分析结果；
• 顾客指定蛋白质对应的质谱峰图；
• 完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等；
• 详细的数据分析结果展示

客户送样须知：

• 您只需提供待测样本，无需提供其他试剂；
• 您所提供的待测蛋白量应≥50ug，浓度≥5ug/uL，否则同位素无法标记；
• 您也可以选择直接提供组织或者细胞，后续操作由我们进行。
• 蛋白质样本需用干冰或液氮寄送，武汉地区客户可上门收样。