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- 传代细胞培养（加药干预）
- 江苏南京
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- 2025年12月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
传代细胞培养（加药干预）
- 提供商：
凯基生物
| 传代细胞培养（加药干预） | |
| 实验目的 培养大量状态良好的细胞、加药干预制备细胞模型用于后续实验，液氮保存细胞株 实验原理：体外模拟细胞生长环境使细胞正常增殖，药物干预后观察形态变化 实验材料仪器：超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜 实验内容与方法： 1. 细胞置于完全培养基中，于37℃，5%CO2培养箱中培养 2. 2-3天传代一次，加药干预后观察细胞状态 客户提供实验信息： 1、实验信息（客户提供）： 样品信息 （包括来源、全称等） 2、实验材料提供 （1）样本材料 生长状况良好的宿主细胞株，细胞培养条件 （2）试剂： 培养基、血清、如有特殊成分，需客户提供、药物及加药浓度 服务周期：细胞培养：天、细胞液氮保存：年 结果提交：细胞培养：细胞及细胞图片 细胞液氮保存：细胞及活性检测报告 加药干预：干预后的细胞及细胞图片 |
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文献和实验(一)原理 体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。 细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期
一、传代细胞的传代培养（1）吸除或倒掉原瓶中的旧培养基（以25mL培养瓶为例）。（2）每瓶加入2mL,无钙、镁PBS，漂洗一次后倒掉。（3）每瓶加入1mL消化液（0.25%胰蛋白酶或0.02%EDTA或混合液），轻轻摇动培养瓶，经消化液铺满所有细胞表面，待细胞层略有松动，肉眼可观察到“薄膜”现象时，倒掉消化液，再继续作用2~3分钟，轻轻摇动，细胞层可随残留的消化液呈片状从瓶壁上脱落下来，在显微镜下可发现细胞回缩变圆，细胞间隙增大，此时应立即终止消化。（4）加入完全培养基5mL，用吸管反复吹打瓶
什么是传代细胞培养？原代细胞或细胞株或细胞系需在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的原代细胞或细胞株或细胞系或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续，这个过程体外培养称为传代细胞培养。一般认为，细胞培养形成单层汇合，细胞密度与生存空间有密切的关系，将培养细胞分散，以1:2或l:3或1:4以上的比率转移分散进行培养，即为传代细胞培养。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数／100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％
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