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shRNA表达克隆
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GeneCopoeia
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现货shRNA克隆
OmicsLink™ shRNA表达克隆
shRNA抑制效率保证
对于构建到慢病毒和哺乳动物载体的shRNA克隆,我们针对每个基因提供3个克隆,在靶细胞的转染效率达到85%以上的情况下,保证至少有1个克隆通过qRT-PCR检测对靶基因的表达抑制水平达到70%以上。靶向任意细胞
使用慢病毒和非病毒载体系统,既可以转染或转导shRNA进入常规的分裂细胞,也可以进入难转染的非分裂细胞,如原代细胞、神经元细胞等。灵活的载体选择
每个shRNA克隆提供5 µg纯化质粒,也提供客户定制的慢病毒载体的shRNA克隆。定制该克隆,请填写表格。标签及报告基因
载体中带有的mCherry和eGFP报告基因可以用于监测转染和转导效率,嘌呤霉素标记可用于稳定细胞系的筛选。全长测序的表达框架
载体的插入序列已经过测序,包括启动子、编码shRNA的正义和反义链、发夹结构、终止子和其他接头序列。
图1. shRNA克隆的病毒和非病毒表达载体
OmicsLink shRNA表达克隆载体
| 载体 | 启动子 | 筛选标记 | 报告基因 | 病毒类型 |
| psi-H1 | H1 | Puromycin | eGFP | N/A |
| psi-U6 | U6 | Puromycin | eGFP | N/A |
| psi-mH1 | H1 | Puromycin | mCherry | N/A |
| psi-mU6 | U6 | Puromycin | mCherry | N/A |
| psi-nH1 | H1 | Puromycin | N/A | N/A |
| psi-nU6 | U6 | Puromycin | N/A | N/A |
| psi-LVRH1GP | H1 | Puromycin | eGFP | HIV |
| psi-LVRU6GP | U6 | Puromycin | eGFP | HIV |
| psi-LVRH1MP | H1 | Puromycin | mCherry | HIV |
| psi-LVRU6MP | U6 | Puromycin | mCherry | HIV |
| psi-LVRH1P | H1 | Puromycin | N/A | HIV |
| psi-LVRU6P | U6 | Puromycin | N/A | HIV |
| psi-LVRU6GH | U6 | Hygromycin | EGFP | HIV |
| psi-LVRH1GH | H1 | Hygromycin | EGFP | HIV |
| psi-LVRU6MH | U6 | Hygromycin | mcherry | HIV |
| psi-LVRH1MH | H1 | Hygromycin | mcherry | HIV |
| psi-LVRU6H | U6 | Hygromycin | N/A | HIV |
| psi-LVRH1H | H1 | Hygromycin | N/A | HIV |
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http://www.igenebio.com/product/shrna-clones/
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文献和实验- Wang, Q., et al. (2022). Post-translational control of beige fat biogenesis by PRDM16 stabilization. Nature doi: 10.1038/s41586-022-05067-4
- Papadas, A., et al. (2022). Stromal remodeling regulates dendritic cell abundance and activity in the tumor microenvironment. Cell Rep doi: 10.1016/j.celrep.2022.111201
- Wang, Y.L., et al. (2022). KCTD7 mutations impair the trafficking of lysosomal enzymes through CLN5 accumulation to cause neuronal ceroid lipofuscinoses. Sci Adv doi: 10.1126/sciadv.abm5578
ELISA临床质量评价与质量管理ELISA试剂的评价(evaluation)分两个方面:一是试剂本身的质量评价,符合一定要求后才能生产供应;一是在临床应用中效果的评价。以肝炎ELISA诊断试剂为例,首先必须通过中国药品生物制品检定,以得到生产的许可。检定内容除包装、标签、说明书等外,对试剂的性能,如特异性、灵敏度、精密度和线性等均需逐项检定,通过对一系列参比品的检测,结果符合要求者才为合格。ELISA试剂的临床质量评价是用该试剂对临床样本进行检测,以观察其实际应用价值。部临检中心对乙肝
与二聚体位点相当。如果这些位点(0.13/碱基)在DNA分子上随机分布,一个500bp片段的DNA分子链上将有32处损伤位点,那么,105个这样的分子中每个分子中会至少有一处损伤。相反,如果100bp的片段,每条链上仅有6处损伤,105个拷贝分子中将有许多分子没有任何损伤。这就是UV照射有一定的片段长度限制的原因。 (二)反应液污染 可采用下列方法之一处理: 1. DNase I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室温反应30 min后加热灭活,然后加入模板
储存在-20℃。以大于10μM浓度溶于TE的引物在 -20℃可以稳定保存6个月,但在室温(15℃到30℃)仅能保存不到1周。干粉引物可以在-20℃保存至少1年,在室温(15℃到30℃)最多可以保存2个月。3. optimize reactants concentrationa. magnesiom ionsMg2+离子的作用主要是 dNTP-Mg 与核酸骨架相互作用 并能影响Polymerase的活性,一般的情况下 Mg2+的浓度在0.5-5mM之间调整,同样要记住的是在调整了dNTPs的浓度后要相应
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