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MTT assay

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      MTT assay

    上海安普生物科技有限公司提供MTT assay 实验

    原理
    MTT比色法以活细胞代谢物还原剂3-(4,5-二甲基噻唑-2) –2,5-二苯基四氮唑嗅盐,商
    品名为噻唑蓝,简称MTT 。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原成为难溶性的蓝紫色结晶物甲臢(formazan)并沉积在细胞中,而死去的细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臢,利用酶联免疫检测仪测定490 nm波长处的光密度OD值,可以间接反映出活细胞数量。在一定范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。该方法已经广泛用于一些生物活性因子的活性检测,大规模的抗肿瘤药物筛选,细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
    同时,我们也可根据客户要求设计与上述信号通路调节相关的其它实验,构成完整的、高水平的论文内容。

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      这段做MTT走了不少弯路,后来看了园子里有许许多多的建议和指导,再做时结果好了很多,心里很是感激,于是把众多的帖子进行了总结,希望对后来者有所帮助!同时感谢各位前辈的良帖!!MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满

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