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- 保存条件:
-20度
- 保质期:
现询客服
- 英文名:
Prestained Protein Marker(14.4kD-97.4kD)
- 库存:
大量
- 供应商:
Solarbio
- 规格:
20T
货号: PR1600
保存: -20℃可保存至少六个月。避免反复冻融,建议分装冻存。
规格: 20T (200μ1)
产品简介:
本产品包含6种预染的已知分子量的标准蛋白质,每种含量约为40ug,原分子量范围为14.4kD-97.4kD,
预染后分子量会稍有变化。可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经
SDS-PAGE凝胶电泳后转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的6条蓝色为的蛋白条带。
使用说明:
1. 开封后,加入200μl 的1×蛋白上样缓冲液,于95℃水浴加热5分钟,根据需要进行小量分装,每管10μl,-20
℃贮存,每次取一管使用。
2. 使用前取一管置室温融化后即可上样电泳,上样量为5-10μl。
3. 建议分离胶浓度为12% 。
成 分 原分子量(kDa) 预染后分子量(kDa)
兔磷酸化酶 B 97.4 99.0
牛血清白蛋白 66.2 70.0
兔肌动蛋白 43.0 43.0
牛碳suan酐 31.0 31.0
人生长激素 22.0 24.0
鸡蛋清溶菌酶 14.4 15.0
注意:蛋白Marker 95℃加热是必需的,否则电泳后一些蛋白会沉积在分离胶的上沿,出现一条蛋白质杂带。
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文献和实验liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达,分子量是14kd,5%的浓缩胶70v,12%,或15%的分离胶110v,跑90min。湿转:100v,90min。封闭用5%的脱脂奶粉,封闭3h(因为背景深,以为封闭久会好些)。一抗1:3000,4度过夜,二抗1:5000,孵育1h,洗膜都是用TBST漂洗15min ×4次。但是显影后背景特别深,虽然可以看见目的条带,但还是有一些非特异性的条带出现,不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。
【求助】180KD的膜蛋白western转膜条件怎样?(湿转)
zhywang4072 鄙人现在做一180KD的蛋白,之前转PVDF膜用的是100v两个半小时,预染marker转得很漂亮,内参也很不错,但是目标蛋白条带却没有,请教各位大侠,这是什么原因?还有诸位大蛋白转膜时候条件怎样?我用的是湿转,谢谢 wodezxn 我觉得100V2h肯定是足够了,没转上应该是你目的蛋白的问题,可能是蛋白表达量太少或者你提蛋白的时间有问题。 zhibinx2007
电泳过程同样很重要啊。电转的时候其实只要预染marker只要转到膜上了,那么你的相应分子量的目的蛋白也就转过去了,所以这就是你摸索条件的指示带。3、电泳过程中有推荐TRICINE-SDS-PAGE胶来进行电泳,会更有利于小分子量蛋白的分离,研读了一些文献,这个效果应该还是很肯定的,但是鄙人没有做过这种电泳,所以给不了什么经验,我最终还是用普通SDS-PAGE胶做出来的,不过鉴于我的蛋白分子量是11KD,那么假如你是几KD甚至更小分子量的多肽,那么还是建议你用TRICINE-SDS-PAGE胶来电











