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- 2025年12月02日
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100ul
预染蛋白Ladders/marker用于监控蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、验证Western时蛋白转移至PVDF、尼龙和硝酸纤维膜的效率、粗略鉴定蛋白大小等。预染的蛋白分子量标准由预染的原核生物重组蛋白组成，是预染的天然蛋白的混合物。彩色预染中分子蛋白质marker是一个三色分子量标准，含有10种蛋白，分子量范围为10 - 170 kDa。该分子量标准含有两条参考条带，分别为70 kDa的橙色参考条带和10 kDa的绿色参考条带。
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文献和实验蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化
或重组的纯化蛋白混合物组成。在凝胶或膜上显示其位置需要染色步骤。预染标准允许在电泳过程中监测蛋白分离，也可以在随后的印迹步骤中指示转移效率。然而，它们比较昂贵且加入染料会影响蛋白迁移率。预染标准在确定分子量时可能 不够精确，并且蛋白质上附加的染料在转移时会影响它们吸附到膜上的能力。 聚丙烯酰胺浓度 凝胶中聚丙烯酰胺浓度可以是均一浓度或是梯度浓度。最常见的聚丙烯酰胺浓度为10%，最适合分离10-150KD范围内的蛋白质。若要分析未知蛋白或许要更宽的分离范围，推荐使用梯度
蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错，另外提醒一句，特别小的蛋白Marker条带如果要显色好，上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物，通过与染料共价耦联，在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验，这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后，以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如，已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处。如果使用预染Marker
其实也有很大范围的调整 ，并不是非要固定于哪一个最合适，曾经做过 一张膜转，17 KD的和170 KD的，按照170 KD的条件，17 KD的转膜也很好的。 蛋白来源：人非小细胞肺癌细胞系 蛋白名称（可保密）：保密 蛋白分子量：大于250 kD WB用膜类型、孔径
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