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全小鼠切片(Whole-body slide),能够完整体现动物体内脏器本身状态,解剖比邻关系,是全面掌握动物结构极其重要的技术手段。以往全动物乃至人体全切片,仅仅是比对影像图像CT、MRI所做的cm级或mm级切片,远达不到观察微观结构水平。此项技术,全小鼠μm级切片,为传统解剖学、组织学科研教学开辟一个全新视角;在药物开发评价组织交叉反应(TCR)中也会发挥更大作用。
免疫荧光多重染色(mIHC),是近年兴起的一种观察多种生物标志物(Marker)在组织样本内共表达十分有意义的技术。在全动物切片上的mIHC技术,把两项新技术有机结合起来,对科研、教学及药物开发会产生重大影响;尤其对细胞药、抗体药在体内分布情况,靶器官的探索、评价,都会起到无可比拟的作用。
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或50ul 一抗(灭活PLB免疫小鼠所得到的多抗,1:3000稀释),阴性对照采用普通血清, 室温下孵育2小时,或4℃过夜。 6. TBS洗3次,每次5min,除去TBS液,每张切片加一滴或50ul polymer enhancer( 试剂 A), 室温下孵育20min, TBS冲洗3次, 每次3min。 7. 除去TBS液,每张切片加一滴或50ul 过氧化物酶标记的抗鼠/兔聚合物(试剂B),室温下孵育30min,TBS洗3次,每次3min
抗原修复工作液于1000ml烧杯中,在小功率电炉上加热,至似沸微沸(为了防止脱片)。将组织切片缓慢放入烧杯。继续加热,保持液体在微沸状态20分钟。将烧杯移开火源,室温下自然冷却后取出切片,蒸馏水洗1次3分钟,TBS洗2次每次3分钟。4. 每张切片加一滴或50ul 3%过氧化氢溶液,室温下孵育10min, 以阻断内源性过氧化物酶的活性。 TBS冲洗3次,每次3min。5. 除去TBS液,加一滴或50ul 一抗(灭活PLB免疫小鼠所得到的多抗,1:3000稀释),阴性对照采用普通血清, 室温下孵育
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