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文献和实验琥珀酸脱氢酶硝基蓝四唑盐法 在生物代谢过程中,由氢的供体(donor)把氢原子转移到氢的受体(receptor)的酶促反应称脱氢酶反应,该反应由脱氢酶(dehydrogenases)催化。脱氢酶种类很多,其活性均可通过四唑盐显示。四唑盐作为脱氢酶反应中的受氢体,接受脱氢酶作用于底物所释放的氢而形成有色的甲腊(formazane),沉积于酶所在部位。 琥珀酸脱氢酶(succlnate dehydrogenase,SDH)是线粒体呼吸链的第一个酶,存在于所有有氧呼吸的细胞
NaN3, 50 mg MgCl2 in a final volume of 500 ml sdH2O). Read absorbence values at appropriate time intervals (usually every 15 minutes, a shorter interval is required if the color reaction is quicker; watch color development
继续培养至48h,收集上清液,置-20℃冰箱保存,待测 IL-1活性及含量。(二)L929细胞增殖MTT比色法MTT比色分析法的原理是利用四甲基偶氮唑盐[3-(4.5-dimethylthiazol-2-y1)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT)在活细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶作用下,被还原成兰黑色的MTT-甲 ,形成MTT-甲 的量与细胞增殖程度呈正相关。故通过测定细胞形成MTT-甲 量,可间接定量分析细胞的增殖情况,具体步骤如下:1、将生长
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