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- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
上海经科化学科技有限公司
- 服务名称:
FISH(双标)+IF7标扫描全套
- 规格:
单标/7标
| 规格: | 单标 | 产品价格: | ¥500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 7标 | 产品价格: | ¥4100.0 |
一、服务简介
技术痛点与方案原理
二、服务核心优势
- 单张组织切片可同时留存双组核酸、七种靶蛋白荧光信号,规避荧光淬灭、多荧光染料互相串色干扰;
- 搭配 TSA 酪胺信号放大技术,放大阳性信号,检测灵敏度更高,同源、异源一抗均可适配开展实验;
- 高分辨率全景成像,以 DAPI 信号为对齐基准,采用 0.5 像素高精度重合算法匹配各轮扫描画面,融合图像组织对位精准、数据完整;
- 配套轻量化图像浏览分析软件,普通办公电脑即可读取全景图像文件,一键输出共定位细胞数量、阳性比率、细胞密度等量化参数,无需高端服务器硬件支撑。
三、完整标准实验流程
- 样本准备
- 热修复处理
- 蛋白酶 K 消化处理
- 核酸片段 FISH 标记
- DAPI 复染细胞核并封片
- 切片高清全景扫描,留存 FISH 通道原始图像
- 拆除盖玻片,洗脱核酸探针
- 专用荧光淬灭设备清除 FISH 荧光基团
- 抗原修复
- 内源性过氧化物酶封闭处理
- 血清封闭
- 第一种一抗孵育
- HRP 标记二抗孵育
- iF488-TSA 荧光标记
- 抗体洗脱液洗脱本轮一抗、二抗
- 循环执行血清封闭、一抗、HRP 二抗、TSA 标记、洗脱整套流程,依次完成第二至第七种靶蛋白染色;每轮染色后均执行 DAPI 复染、封片、全景扫描、清除荧光基团操作
- 全部轮次实验完成后,软件对所有扫描图像开展高精度融合处理
四、样本适配与送样运输规范
- 石蜡切片常温保存运输;冰冻切片 - 20℃保存运输。
- 细胞爬片、细胞滴片、细胞涂片不适用本方案:拆除盖玻片易造成细胞脱落,多轮扫描无法保证视野完全重合,图像无法正常融合。
- 实验全程切片组织形态结构必须保持一致,否则各轮扫描图像无法匹配融合。
五、交付成果
FISH(单标)+IF双标扫描全套
FISH(单标)+IF3标扫描全套
FISH(单标)+IF4标扫描全套
FISH(单标)+IF5标扫描全套
FISH(单标)+IF6标扫描全套
FISH(单标)+IF7标扫描全套
FISH(单标)+IF8标扫描全套
FISH(单标)+IF9标扫描全套
FISH(单标)+IF10标扫描全套
FISH(双标)+IF单标扫描全套
FISH(双标)+IF双标扫描全套
FISH(双标)+IF3标扫描全套
FISH(双标)+IF4标扫描全套
FISH(双标)+IF5标扫描全套
FISH(双标)+IF6标扫描全套
FISH(双标)+IF7标扫描全套
FISH(双标)+IF8标扫描全套
FISH(双标)+IF9标扫描全套
FISH(双标)+IF10标扫描全套
FISH(三标)+IF单标扫描全套
FISH(三标)+IF双标扫描全套
FISH(三标)+IF3标扫描全套
FISH(三标)+IF4标扫描全套
FISH(三标)+IF5标扫描全套
FISH(三标)+IF6标扫描全套
FISH(三标)+IF7标扫描全套
FISH(三标)+IF8标扫描全套
FISH(三标)+IF9标扫描全套
FISH(三标)+IF10标扫描全套
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文献和实验)技术 荧光原位杂交技术( fluorescence in situ Hybridization,FISH )是一种非放射性原位杂交方法,用特殊的荧光素标记 DNA 探针,在染色体、细胞或组织切片标本上进行 DNA 杂交,以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。近年来随着 FISH 所应用的探针种类的不断增多, FISH 技术不仅在细胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤的诊断、基因定位等。原有的放射性同位素原位杂交技术存在许多缺点,如每次检测需要重新进行标记,标记步骤繁琐
能否应用于某一领域也取决于是否具有相应的探针。用于FISH检测的探针必须具备很高的特异性,能特异性地识别特定的基因或染色体上特定的片断。而且FISH的探针必须能经受原位杂交的处理而不变性。荧光基团的标记也直接影响了检测的灵敏度和原位杂交结果的检测方式。以著名的探针生产商Vysis公司的LSI系列探针为例:LSI系列探针来源于BAC大片断基因组文库,探针所覆盖的染色体片断总长可达100Kb-400Kb,保证了探针的高特异性和极强的荧光信号;荧光基团采用直接标记法标记,不同波长的荧光基团使探针在荧
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