猪流感病毒N2亚型(SIV-N2)核酸检测试剂盒（荧光PCR

猪流感病毒N2亚型(SIV-N2)核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

基本信息
产品名称：猪流感病毒 N2 亚型（SIV-N2）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）
英文名称：Swine Influenza Virus N2 Subtype (SIV-N2) Nucleic Acid Detection Kit (Real-time Fluorescent PCR Method)
规格：25T / 盒、50T / 盒
货号：XY-PCR212Y（烜雅生物）
用途：仅供科研使用，不可用于临床诊断

检验原理
采用TaqMan 探针法实时荧光 RT-PCR 技术，针对 SIV-N2 亚型病毒NA 基因（神经氨酸酶基因）的高度保守区域设计特异性引物与荧光探针（通常为 FAM 标记）。样本中病毒 RNA 经逆转录为 cDNA 后，在 PCR 扩增过程中，探针与模板结合并被 Taq 酶切割，释放荧光信号；仪器实时监测荧光强度，通过Ct 值判定样本中是否存在 SIV-N2 病毒核酸。

主要组成成分
组分    规格    数量    备注
SIV-N2 RT-PCR 反应液    2×    1 管    含引物、探针、dNTP、缓冲液
逆转录酶混合物    10×    1 管    含逆转录酶、Taq 酶
阴性对照    无模板    1 管    无菌水，无 SIV-N2 核酸
阳性对照    质粒 / 灭活病毒    1 管    含 SIV-N2 靶标核酸
内标（可选）    10×    1 管    监控样本提取与扩增抑制

样本类型
猪鼻拭子、咽拭子
肺脏、气管组织
支气管肺泡灌洗液、病毒培养上清

技术参数
灵敏度：最低检出限≤500 拷贝 /mL，可检测低至 10² 拷贝 /μL 的病毒 RNA。
特异性：与 H1、H3、H5、H9 等其他流感亚型及猪圆环病毒、蓝耳病病毒等无交叉反应。
重复性：CV 值≤3%。
反应体系：25μL / 孔（模板 RNA 5μL + 反应液 20μL）。
扩增程序：
逆转录：50℃，15min
预变性：95℃，3min
循环（40 次）：95℃ 15s → 60℃ 30s（收集荧光）
检测时间：扩增≤38min，全流程（含提取）≤70min。

保存条件与有效期
保存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融。
有效期：12 个月（未开封）；开封后 1 个月内用完。

结果判定
阳性：FAM 通道有明显扩增曲线，Ct 值≤38。
阴性：无扩增曲线或 Ct 值＞38。
无效：阳性对照无扩增、阴性对照出现扩增或内标未起反应。

注意事项
严格分区操作（试剂配制、样本处理、扩增），防止交叉污染。
样本需低温运输、-80℃保存，避免 RNA 降解。
实验耗材需无酶、无菌处理。
试剂盒仅用于科研，严禁临床诊断。